【摘 要】
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刺激隐核虫病是由刺激隐核虫(Crytocaryon irritans)寄生于海水硬骨鱼类体表而引起的一种致死性寄生虫病。近年来,刺激隐核虫病成为大黄鱼(Pseudosciaena crocea)主要的疾病
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刺激隐核虫病是由刺激隐核虫(Crytocaryon irritans)寄生于海水硬骨鱼类体表而引起的一种致死性寄生虫病。近年来,刺激隐核虫病成为大黄鱼(Pseudosciaena crocea)主要的疾病之一,严重危害大黄鱼养殖业的健康发展,然而,迄今尚无有效的防控措施。本论文使用福尔马林杀虫、通过垫布移除刺激隐核虫包囊以及免疫接种防止再感染的方法对大黄鱼刺激隐核虫病进行了防控试验及效果评价,以期为该病的防控提供理论依据和实践指导。1、为了合理使用福尔马林防治大黄鱼刺激隐核虫病,本文评估了福尔马林杀灭体外刺激隐核虫效果和治疗效果,并进行了福尔马林对大黄鱼的安全性评估。结果显示福尔马林可以有效杀灭刺激隐核虫,对幼虫处理10、30、60、120 min的最小杀虫浓度分别为62.5、62.5、31.3、5.6 mg/L;对包囊处理1、2、4 h的最小杀虫浓度分别为150、75、75 mg/L;福尔马林对大黄鱼幼鱼12、24、48、96 h的半致死浓度(LC50)分别为394.7、365.3、334.4、322.8 mg/L;125 mg/L福尔马林药浴2 h可有效防治大黄鱼刺激隐核虫病,存活率显著高于75 mg/L组和对照组。结果表明,福尔马林可有效防治大黄鱼刺激隐核虫病。2、为了通过切断刺激隐核虫生活史达到控制刺激隐核虫病的目的,本文建立了一种通过垫布移除水体中刺激隐核虫包囊或定期轮换养殖池的方法控制感染低剂量刺激隐核虫的花尾胡椒鲷(Plectorhynchus cinctus),记录各组鱼的每天摄食量、死亡数和相对感染强度。感染后第4周,检测垫布组、轮换组和空白组鱼的血清阻动效价,同时用致死剂量攻毒,检测三组鱼的免疫保护率。结果显示通过垫布移除水体中刺激隐核虫包囊或定期轮换养殖池的方法均可有效控制刺激隐核虫感染,垫布组、轮换组的摄食量、相对感染强度在2周内逐渐恢复至空白组水平;第2周垫布组、轮换组、感染组和对照组存活率分别为97.0%、98.0%、0%和100%;第4周垫布组和轮换组血清阻动效价和攻毒后存活率均显著高于对照组。通过建立的垫布移除法控制感染刺激隐核虫的大黄鱼,结果显示,每2或3天更换垫布组的存活率显著高于每4天更换垫布组和对照组。结果表明,在工厂化养殖中,可以通过移除刺激隐核包囊控制该病,从而减少化学药物使用。3、为了研究免疫方法预防刺激隐核虫病的效果,将刺激隐核虫幼虫分别与白油、Quil-A佐剂制成白油灭活疫苗和刺激隐核虫抗原免疫复合物(ISCOMs),然后腹腔注射免疫(剂量为20μl、1万幼虫/鱼)大黄鱼,设立了白油组、ISCOMs组,以PBS作为对照组,第2周加强免疫一次。在第0、1、2、4、6、8周抽血测定各组血清抗体效价;在第4、8周用致死剂量攻毒,统计死亡率;第8周每个平行组另选15尾鱼用亚致死剂量攻毒,48 h统计各组实验大黄鱼的鳃的滋养体数量,并计算相对感染强度,72 h后收集包囊测量其大小(直径)。结果显示:免疫1周后白油佐剂疫苗和ISCOMs疫苗均能诱导鱼体产生特异性抗体,并在第6周达到峰值,抗体滴度分别为1:359.2、1:430.7;第4、8周各组经致死剂量攻毒后,白油组和ISCOMs组的死亡率均显著低于对照组;第8周经亚致死剂量攻毒,白油组和ISCOMs组的相对感染强度下降率分别为37.2%、30.7%,包囊体积分别比对照组相对减小40.2%和13.4%。由此可见,刺激隐核虫灭活疫苗对大黄鱼具有较强的免疫原性,可提高大黄鱼的免疫力并能有效降低刺激隐核虫的感染强度。
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