二甲双胍联合洛铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响

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目的:探讨二甲双胍联合洛铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法:本实验利用人卵巢癌SKOV3细胞,用Mc Coy’s 5A培养基体外培养24小时、48小时和72小时。实验分为4组:对照组,二甲双胍组(0.3mmol/l、2.5mmol/l、5mmol/l),洛铂组(0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml)和二甲双胍联合洛铂组,在光镜和透射电镜下观察各组不同时间点SKOV3细胞的形态变化和生长方式,MTT法检测不同浓度和时间点的细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞的周期分布。结果:1.对照组SKOV3细胞生长良好,培养液澄清,无浑浊,细胞形态饱满,边界清晰,透光性好。与对照组相比,二甲双胍组细胞数量减少,细胞形态逐渐由多边形转变为梭行或圆形。与对照组相比为洛铂,随药物浓度的增加,贴壁的正常细胞数逐渐减少,并可见较多的凋亡细胞,这些细胞多散在,或呈小堆排列。细胞皱缩呈圆形或卵圆形,胞质皱缩。与对照组相比,两药合用组活细胞数明显减少,细胞呈圆形,透光性差。2.MTT法检测3个不同时间和不同浓度二甲双胍和洛铂对SKOV3细胞影响。(1)不同浓度的二甲双胍(2.5mmol/l、5mmol/l)在24小时、48小时和72小时对SKOV3细胞增殖有剂量和时间依赖性抑制作用(P<0.05)。(2)洛铂浓度为0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml时,对SKOV3细胞24小时、48小时和72小时的存活率均受到明显抑制(P<0.01)。(3)将低剂量二甲双胍(2.5mmol/l)与不同浓度的洛铂(0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml)联合应用于SKOV3细胞。单用洛铂治疗相比,两种药物的联合治疗显著降低了细胞增殖(P<0.001)。3.流式细胞仪检测结果显示,采用对照组细胞多数出现在G1期,出现少数在G2/M期,其余细胞则出现在S期。与对照组相比,二甲双胍能增加G1期和G2期细胞数,S期细胞数减少。与对照组相比,洛铂使G1期和S期细胞增多,G2期细胞减少。与对照组相比,两药联合用可导致G1期细胞数减少,S期和G2/M期细胞数增加(P<0.01)。结论:1.本研究结果表明二甲双胍和洛铂两种药物对卵巢癌的增殖具有剂量和时间依赖性的抑制作用。2.两种药物的联合应用比单独使用任何一种药物都具有更强的抑。与对照组相比,两药合用可增加细胞周期G2期的细胞数。
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