【摘 要】
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目的:优选排脓散水提工艺,考察排脓散对溃疡性结肠炎大鼠的干预作用,探讨排脓散中桔梗的“引经”作用,为进一步研究开发排脓散提供实验依据。方法:建立排脓散提取液中3个指标成分（柚皮苷、新橙皮苷、芍药苷）HPLC含量测定方法,以料液比、浸泡时间、提取时间为影响因素,以指标成分含量和出膏率为考察指标,采用Box-Behnken设计法优选排脓散的水提工艺。采用TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型,通过评估大鼠疾
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目的:优选排脓散水提工艺,考察排脓散对溃疡性结肠炎大鼠的干预作用,探讨排脓散中桔梗的“引经”作用,为进一步研究开发排脓散提供实验依据。方法:建立排脓散提取液中3个指标成分（柚皮苷、新橙皮苷、芍药苷）HPLC含量测定方法,以料液比、浸泡时间、提取时间为影响因素,以指标成分含量和出膏率为考察指标,采用Box-Behnken设计法优选排脓散的水提工艺。采用TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型,通过评估大鼠疾病活动指数、肺和结肠湿重及指数变化,检测血清、结肠和肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB含量,观察结肠、肺组织病理损伤程度,考察排脓散对溃疡性结肠炎肺损伤疗效。建立排脓散活性成分柚皮苷和芍药苷体内含量HPLC-MS/MS分析方法,在给予正常和模型大鼠灌胃排脓散全方与缺桔梗方后,考察机体正常和病理状态下柚皮苷和芍药苷在血浆、肺和结肠中的含量变化,从血液药动学和组织分布角度探讨桔梗在排脓散中的引经作用。结果:排脓散最佳提取工艺为:15倍量水,浸泡67 min,提取74 min。大鼠经TNBS诱导,2 d形成溃疡性结肠炎,组织病理学观察到大鼠结肠组织病变累及其肺损伤。排脓散高剂量干预后显著提高大鼠疾病活动指数,降低肺和结肠湿重及指数,降低血浆、结肠和肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB含量（p<0.05）,显著改善结肠和肺组织结构损伤。正常大鼠灌胃排脓散全方和缺桔梗方后,柚皮苷血液药动学参数AUC（0-∞）分别为3023.14±470.25μg/L·h、2034.15±493.25ug/L·h,MRT（0-∞）分别为10.21±0.82 h、8.83±0.47 h,Cmax分别为597.57±22.46μg/L、477.13±25.67μg/L,差异具有显著性（p<0.05）;芍药苷血液药动学参数AUC（0-∞）分别为3332.94±255.84μg/L·h、1569.75±479.63μg/L·h,MRT（0-∞）分别为5.15±0.49h、13.53±7.33 h,Cmax分别为816±28.88μg/L、402.67±58.22μg/L,差异具有显著性（p<0.05）。模型大鼠灌胃排脓散全方和排脓散缺桔梗方后,柚皮苷血液药动学参数AUC（0-∞）分别为4400.16±518.43μg/L·h、3583.56±250.55μg/L·h,CL分别为448.31±31.29 L/h/kg、367.78±42.58 L/h/kg,Tmax分别为6.68±0.23 h、5.47±0.67h,差异具有显著性（p<0.05）;芍药苷血液药动学参数AUC（0-∞）分别为3873.53±245.81μg/L·h、1917.98±99.88μg/L·h,MRT（0-∞）分别为4.86±0.16 h、6.11±0.31 h,Cmax分别为766.06±27.38μg/L、435.09±15.97μg/L,Tmax分别为3.41±0.25 h、4.02±0.74 h,差异具有显著性（p<0.05）。大鼠结肠和肺组织分布结果显示,正常或模型大鼠体内,排脓散全方药液中柚皮苷浓度均高于排脓散缺桔梗方;柚皮苷和芍药苷在模型大鼠结肠和肺组织中的达峰和消除时间较正常大鼠均有延长。结论:Box-Behnken实验设计法优化排脓散的水提工艺方法可行,预测性较好。排脓散提取液对溃疡性结肠炎大鼠具有治疗作用,桔梗可能通过“引药入肺”作用改变柚皮苷和芍药苷的血液药动学和肺、肠组织分布,促使排脓散对UC大鼠结肠与肺损伤具有良好改善作用。
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