【摘 要】
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十二指肠贾第虫是一种常见的人兽共患寄生虫,主要引起宿主腹泻、体重减轻和消化吸收不良等症状。世界范围内,牛感染十二指肠贾第虫较为常见,给奶牛养殖业造成一定危害。本研究采用PCR法对新疆部分规模化奶牛场十二指肠贾第虫动态感染情况进行调查,掌握其集聚体分布特点和遗传进化特征,为我国牛的十二指肠贾第虫病防治提供基础参考资料。1.在阿拉尔市某规模化奶牛场,选择25头新生犊牛为研究对象,从1周龄开始连续采集犊
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“新疆家畜十二指肠贾第虫宿主适应遗传特征研究”（项目编号:31960704）课题主持人:井波 教授; 新疆生产建设兵团重点领域科技攻关计划项目“南疆地区牛羊重要食源性人畜共患细菌及寄生虫病预警防控研究”（项目编号:2020AB025）课题主持人:齐萌 副教授
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十二指肠贾第虫是一种常见的人兽共患寄生虫,主要引起宿主腹泻、体重减轻和消化吸收不良等症状。世界范围内,牛感染十二指肠贾第虫较为常见,给奶牛养殖业造成一定危害。本研究采用PCR法对新疆部分规模化奶牛场十二指肠贾第虫动态感染情况进行调查,掌握其集聚体分布特点和遗传进化特征,为我国牛的十二指肠贾第虫病防治提供基础参考资料。1.在阿拉尔市某规模化奶牛场,选择25头新生犊牛为研究对象,从1周龄开始连续采集犊牛粪便样本至10周龄,每周采集1次,共收集犊牛粪便样本250份。基于十二指肠贾第虫gdh、tpi和bg基因位点,采用PCR法检测犊牛粪便DNA样本,分别成功获得42、68和65条基因序列;发现犊牛十二指肠贾第虫阳性率为33.6%（84/250）;25头犊牛均呈阳性感染,1头2周龄犊牛检出十二指肠贾第虫,犊牛7周龄时十二指肠贾第虫感染率最高,为72%（18/25）。经序列比对分析,鉴定出集聚体A（n=3）、集聚体E（n=73）和混合感染（A+E,n=8）。对所获得的基因序列进行比对分析,17个样本成功在3个位点同时获得基因序列,经多位点序列分型获得15个十二指肠贾第虫MLG亚型;种系进化分析显示15个MLG亚型分为4个MLG亚群结构。研究结果提示,同一个养殖场不同犊牛宿主个体中的十二指肠贾第虫存在遗传多样分布。2.分别于阿拉尔市和呼图壁县4个规模化奶牛场各选择10头新生犊牛为研究对象。从1日龄逐日连续采集犊牛粪便样本至30日龄,共收集犊牛粪便样本1200份。基于十二指肠贾第虫gdh、tpi和bg基因位点,对所有粪便DNA样本进行PCR扩增,在至少1个基因位点成功扩增的样本有129份,犊牛十二指肠贾第虫的阳性率为10.8%（129/1200）;40头犊牛中,33头呈十二指肠贾第虫感染阳性;14日龄犊牛开始感染十二指肠贾第虫,28日龄时达到感染高峰（20/40）;在3个基因位点分别成功获得30、87和61条基因序列。经序列比对分析,鉴定出集聚体E（n=119）、集聚体A（n=2）和混合感染（A+E,n=6）。19个样本在3个基因位点同时获得的集聚体E序列,形成15个MLG亚型;种系进化分析显示,15个集聚体E亚型形成4个亚群结构,每个养殖场的犊牛源十二指肠贾第虫单独形成1个亚群结构。研究结果提示,不同养殖场之间奶牛源十二指肠贾第虫存在一定的场聚集性遗传分布特点。综上所述,新疆部分规模化场新生犊牛十二指肠贾第虫感染率较高;犊牛源十二指肠贾第虫集聚体E具有遗传多样性,不同场之间犊牛十二指肠贾第虫存在一定的场聚集性遗传分布特点。研究结果为我国牛的十二指肠贾第虫病原生物学和分子遗传特征提供了基础资料。
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