新疆南疆部分规模化场绵羊十二指肠贾第虫分子检测与鉴定

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随着经济的发展,绵羊养殖业在我国畜牧业中所占比重不断增加。在世界范围内,绵羊感染十二指肠贾第虫较为普遍。为了解新疆南疆规模化场绵羊的十二指肠贾第虫感染情况及其集聚体遗传进化特征,本研究采用分子生物学方法对其进行检测、序列分析和遗传结构解析,以期为我国绵羊十二指肠贾第虫病的防治提供基础资料。(1)基于十二指肠贾第虫小亚基核糖体r RNA(SSU r RNA)基因位点,采用PCR法对新疆南疆地区6个规模化养殖场767份绵羊粪便DNA样本进行了检测。结果发现,新疆南疆地区规模化养殖场绵羊的十二指肠贾第虫感染率为17.5%(134/767),6个养殖场检测均为阳性,其中以温宿县羊场绵羊的十二指肠贾第虫感染率最高,为23.1%(25/108);于田县、阿拉尔市、库车市、策勒县和疏附县羊场绵羊的十二指肠贾第虫感染率分别为23.0%(48/209)、18.9%(17/90)、17.1%(18/105)、16.7%(25/150)和1.0%(1/105);不同养殖场绵羊十二指肠贾第虫感染率统计学差异极显著(P≤0.01)。不同年龄段以3~6月龄绵羊十二指肠贾第虫的感染率最高,为26.8%(56/209),<3月龄和7~12月龄绵羊感染率次之,分别为18.2%(32/176)和18.1%(32/177),>12月龄的感染率最低,为6.8%(14/205);不同年龄段绵羊十二指肠贾第虫感染率统计学差异极显著(P≤0.01)。对134份阳性PCR产物进行测序,均鉴定为集聚体E。研究结果提示新疆南疆规模化场较为常见绵羊十二指肠贾第虫感染且均为宿主特异性集聚体E。(2)基于谷氨酸脱氢酶(gdh)、磷酸丙糖异构酶(tpi)和β-贾第素(bg)基因位点,采用PCR法对134个绵羊十二指肠贾第虫阳性分离株进行多位点基因分析,分别成功扩增出106份、92份和98份阳性产物;经测序比对后在gdh、tpi和bg位点分别获得4个、8个和12个基因亚型,命名为g E1~g E4、t E1~t E8和b E1~b E12;共有14个十二指肠贾第虫分离株在3个位点同时成功扩增,形成10个多位点基因型,命名为MLG E1~MLG E10,可分为5个亚群,经种系发育分析发现MLG E3~MLG E10与青海省和河南省绵羊中的多位点基因型存在差异,鉴定为新的集聚体E多位点基因型。结果提示,新疆南疆绵羊源十二指肠贾第虫具有遗传多样性和地理区域性分布特点。综上所述,新疆南疆部分规模化场绵羊十二指肠贾第虫感染较为常见,以3~6月龄的绵羊十二指肠贾第虫感染率最高;感染的集聚体均为集聚体E,通过种系发育分析,显示其存在遗传多样性和地理区域性分布。研究结果提示绵羊养殖场应定期进行十二指肠贾第虫检测工作,以保障绵羊养殖业健康发展。
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