对化湿行瘀清热方剂治疗口腔扁平苔藓前后血清中差异蛋白的研究

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目的:对口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者使用化湿行瘀清热方剂前、后血清中的差异蛋白进行研究,探讨化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓的治疗效果及相关作用机制。方法:1抽取OLP患者初诊和经化湿行瘀清热方剂治疗8周后的静脉血,静置30min后离心,吸取上层血清,苯酚抽提法提取总蛋白,Bradford法测定蛋白浓度,采用双向荧光差异凝胶电泳技术(two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2-D DIGE)筛选治疗前、后的差异蛋白。2液相色谱-质谱联用技术(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)鉴定由2-D DIGE筛选出的OLP患者治疗前、后血清中的差异蛋白点。3蛋白免疫印迹法(Western blot)验证OLP患者治疗前后血清中差异蛋白的表达情况。4酶联免疫吸附试验(ELISA)对OLP患者治疗前后血清中差异蛋白的表达情况进行定量研究。结果:1口腔扁平苔藓患者经过化湿行瘀清热方剂治疗前、后的血清中存在差异蛋白点,质谱技术对差异蛋白点进行验证,筛选出的差异蛋白有结合珠蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、补体成分C1、维生素D结合蛋白;2 Western blot结果显示结合珠蛋白的表达量在口腔扁平苔藓患者治疗后的血清中较治疗前高,人抗凝血酶Ⅲ在治疗后的血清中表达量较治疗前低(P<0.05);3 ELISA结果显示结合珠蛋白在口腔扁平苔藓患者治疗后的血清中浓度较治疗前升高(P<0.05)。结论:1化湿行瘀清热方剂治疗口腔扁平苔藓患者前、后的血清中存在的差异蛋白包括结合珠蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、补体成分C1和维生素D结合蛋白。2结合珠蛋白在口腔扁平苔藓患者治疗后血清中的表达升高,人抗凝血酶Ⅲ的表达降低,这两种蛋白表达量的差异与化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓的作用机制有一定关系。
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