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第一部分载汉防己甲素-全氟溴辛烷脂质体的制备及表征检测目的制备一种以脂质体为载体,以液态的全氟溴辛烷（1-Bromoheptadecaflurooct-ane,PFOB）为内核,汉防己甲素（Tetrandrine,Tet）搭载于脂质体壳的纳米粒PFOB@LIP-Tet,并检测其基本的理化性质,证明Tet成功搭载在了脂质体上,并检测其稳定性。方法采用薄膜分散-水化-超声法,利用脂质体搭载汉防己甲素和包裹PFOB,制备PFOB@LIP和PFOB@LIP-Tet纳米粒,并检测其粒径、电位、形态和吸光度;检测PFOB@LIP-Tet中的Tet的量,计算Tet的包封率和载药率;7天平均粒径检测其稳定性。结果成功制备出PFOB@LIP和PFOB@LIP-Tet纳米粒,测得其粒径分别为79.4±7.7 nm和103.4±7.8 nm,表面电位分别为6.0±1.2 m V和-21.8±0.56 m V。紫外吸收光谱检测发现PFOB@LIP-Tet的吸光度主要来自于Tet。投射电镜下PFOB@LIP-Tet是以脂质体为外壳,PFOB在壳内,Tet搭载于脂质体壳中。PFOB@LIP和PFOB@LIP-Tet之间的粒径、表面电位和投射电镜的差异均可证明Tet成功载在了脂质体上。连续7天测得PFOB@LIP-Tet的平均粒径分别为87.5±9.15 nm、86.1±6.8nm、103.4±7.8 nm、100.1±7.8 nm、100.4±12.3 nm、83.4±4.3 nm和97.1±0.6 nm,证明PFOB@LIP-Tet在4℃可以稳定存在。紫外检测其PFOB@LIP-Tet中Tet的包封率和载药率分别为（79.9±8.0）%和（49.9±0.6）%。结论成功制备了载Tet的纳米粒PFOB@LIP-Tet,检测了其基本的理化性质,并且证明了其在4℃下可以稳定存在。第二部分载汉防己甲素-全氟溴辛烷脂质体的药物释放实验、生物安全性和分布目的检测PFOB@LIP-Tet中的Tet释放曲线,以确定缓释体系的建立。确定Tet和PFOB@LIP-Tet安全浓度,选择给药浓度,并检测PFOB@LIP-Tet在体内和体外的积累和分布。方法利用HLPC检测不同时间段PFOB@LIP-Tet中的Tet释放量。用CCk-8检测Tet和PFOB@LIP-Tet的安全浓度,并用活/死染色重复验证选择的给药浓度下PFOB@LIP-Tet各组分的生物安全性。用激光共聚焦检测不同时间段被荧光标记的PFOB@LIP-Tet在正常和致炎的角膜上皮细胞和兔角膜上皮内的积累,并用流式细胞术进行定量分析。用细胞动物活体荧光成像系统间接比较被荧光标记的PFOB@LIP-Tet的正常眼和干眼病模型眼内的积累,并比较在给药相同时间后正常眼和干眼症模型眼的结膜、角膜、虹膜、房水和晶状体内的PFOB@LIP-Tet的积累。结果在480 min时PFOB@LIP-Tet中的Tet的释放达到75%。体外治疗时,Tet的浓度为5μg/ml时,无论是游离的还是载在PFOB@LIP-Tet中,细胞存活率都大于50%。经孵育相同时间,正常兔角膜上皮细胞内的荧光信号要远少于致炎的兔角膜上皮细胞内的荧光信号,正常的角膜上皮内几乎检测不到荧光信号,干眼病兔角膜上皮内检测到强荧光信号。正常眼外的实时荧光信号强度高于干眼病模型眼;给药2 h后,可以在干眼病模型眼的角膜和结膜上检测到荧光信号,且结膜荧光信号较强,正常眼的各组织中只有在结膜上检测到少量荧光信号。结论PFOB@LIP-Tet缓释体系成功构建,体外治疗时,Tet的浓度为5μg/ml时,无论时游离的还是载在PFOB@LIP-Tet,都是安全的,载在PFOB@LIP-Tet后,Tet生物安全性提高。PFOB@LIP-Tet可以很快被致炎的兔角膜上皮细胞吞噬,而正常的兔角膜上皮细胞几乎不吞噬。兔角膜干眼病模型眼内的积累要多于在正常眼内的积累,且主要分布在眼的结膜和虹膜上。第三部分载汉防己甲素脂-全氟溴辛烷质体对干眼病的治疗效果及机制研究目的明确载汉防己甲素脂质体各组分的抗炎作用和对干眼病的治疗效果,检测其对眼压的影响。方法建立兔角膜上皮细胞炎症模型,分成四组,包括对照组、PFOB@LIP组、Tet组和PFOB@LIP-Tet组,RT-PCR检测各组兔角膜上细胞中的VEGF、IL-1β、TNF-α和PEG2的基因转录;ELISA检测各组细胞产生的VEGF、IL-1β、TNF-α和PEG2的浓度;流式细胞术检测PFOB@LIP-Tet各组的细胞存活率。建立兔干眼病模型,共28只模型兔,随机分成四组,包括:ATS组、PFOB@LIP-ATS组、Tet-ATS组和PFOB@LIP-Tet-ATS组,分别用ATS、PFOB@LIP-ATS、Tet-ATS和PFOB@LIP-Tet-ATS进行治疗,比较各组的治疗治疗效果;用荧光素钠对角膜染色,裂隙灯下观察角膜上皮着染;PAS染色观察球结膜杯状细胞形态和数量;H&E染色比较各组角膜上皮的厚度;Tunnel染色检测角膜上皮细胞的凋亡。用小动物眼压计检测治疗后模型兔的眼压变化。结果体外治疗实验中,PFOB@LIP-Tet组细胞的VEGF、IL-1β、TNF-α和PEG2基因表达最少,分泌的VEGF、IL-1β、TNF-α和PEG2的浓度最低,细胞存活率最高。体内治疗实验中,经过相同的治疗时间后,PFOB@LIP-Tet-ATS组的模型兔的角膜着染面积最少,程度最轻,球结膜杯状细胞做多,凋亡细胞最少,角膜上皮最厚;ATS组和PFOB@LIP-Tet-ATS组模型兔的眼压在经治疗后的眼压变化无统计学差异。结论PFOB@LIP-Tet对干眼病有明显治疗效果,且对眼压的影响较小.