miR-375靶向FZD4参与Wnt/β-catenin通路在宫颈癌中的作用及其机制研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:a65681361
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:明确mi R-375表达水平对子宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学特性的影响,并对mi R-375发挥上述作用的靶基因及调控通路进行初步探讨,揭示mi R-375在子宫颈癌中的可能作用及其分子机制。方法:在宫颈癌细胞株Si Ha中,采用细胞瞬时转染技术,转染mi R-375模拟物及抑制物相关片段建立mi R-375过表达和低表达细胞模型,转染FZD4 si RNA相关序列建立FZD4低表达细胞模型,荧光显微镜下拍照确认转染效率。进一步通过实时荧光定量PCR法与Western Blot法分别确认mi R-375与FZD4的转染效果。确认成功建立相应细胞模型后,利用Western Blot法检测Wnt信号通路β-catenin蛋白的表达水平,分别采用CCK8法、划痕实验、Transwell法检测细胞增殖、迁移、侵袭情况。结果:1.经细胞转染,各组细胞中mi R-375相关序列转染效率达90%以上,与相应阴性对照组相比较,mi R-375 mimics组中mi R-375表达上调(8.93±0.96)倍((49)=0.001),细胞增殖、迁移能力降低((49)=0.001),侵袭能力下降(42.95±10.31)%((49)=0.046);mi R-375 inhibitor组细胞中mi R-375表达下调(35.61±10.24)%((49)=0.001),细胞增殖、迁移能力增强((49)=0.001),侵袭能力升高(67.68±13.66)%((49)=0.046);2.经预测,FZD4为mi R-375潜在靶基因,与相应阴性对照组相比较,mi R-375mimics组细胞中FZD4蛋白表达降低((49)=0.023),β-catenin蛋白表达降低((49)=0.001),FZD4蛋白与β-catenin蛋白表达高度正相关(R=0.951,(49)=0.001),并且敲低FZD4表达时β-catenin蛋白表达显著下调((49)=0.001);3.经细胞转染,各组细胞中FZD4 si RNA相关序列转染效率达90%以上,与相应阴性对照组相比较,FZD4 si RNA组细胞中FZD4表达下调(47.41±0.79)%((49)=0.001),细胞增殖、迁移能力降低((49)=0.001),细胞侵袭能力下降(48.32±7.96)%((49)=0.046)。结论:1.子宫颈癌中,mi R-375表达下调促进细胞增殖、迁移与侵袭,参与癌变的进展过程;2.mi R-375通过靶向FZD4参与Wnt/β-catenin通路,实现对子宫颈癌细胞生物学功能的调控。
其他文献
菠萝含有苷类、菠菜蛋白酶以及5-羟色胺等物质,对皮肤、口腔黏膜都有刺激,而且有人天生对菠萝就过敏,在食用菠萝15分钟至1小时左右可能会出现腹痛、恶心、呕吐、腹泻,同时出现过
介绍了4300mm宽厚板定尺剪的结构和组成,分析了影响定尺剪剪切精度的主要原因,并提出了提高定尺剪剪切精度的措施。经过改进后,定尺剪剪切误差控制在1%o以内。
科学技术的高速发展,加快了教育技术改革的步伐。多媒体技术作为现代教育技术的重要组成部分,是优化课堂教学的有效途径之一。运用多媒体技术进行教学已越来越受到广大教师的关
本实验提出采用随机和半脸对照的方法对两款面膜进行试用性比较研究,文章描述了此次研究的方法以及结果,通过比较结果可以更直观的了解面膜在人体面部的试用性,这有利于我们
国资委于2月22日举行新闻发布会,国资委副主任邵宁介绍了"十一五"时期中央企业改革发展情况和"十二五"总体思路,并答记者问。
12月22日下午,教育部新闻发言人王旭明在新华网与网友交流并回答了大家关心的众多问题。对于“教育产业化”现象,王旭明表示,教育部一开始就反对,教育产业化会毁掉中国的教育。
目的:本临床应用通过研究应用和短期观察,初步评价使用空心取骨环钻取骨后原位植入并上颌窦内提同期植入种植体的临床使用效果,并从多个方面探讨使用空心取骨环钻来行上颌窦提
介绍了宝钢 140mm连轧管机组机架的加工工艺和加工过程中的注意事项。该加工工艺适用于对串孔同心度与同轴度精度要求高的工件的加工。
<正>《新世纪》周刊披露,湖北省委第六巡视组在秭归县巡视20余天,总共花费80万元。其中烟酒两项耗费13万余元,旅游费12万余元,并为相关领导购置了两部手机和十部平板电脑……
期刊
大棚茄子利用潜伏芽延后栽培,采用一次育苗,二茬栽培生产,降低了二次育苗生产成本,延长采收时期,满足了晚秋市场淡季需求。