【摘 要】
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目的：研究转化生长因子α(Transforming growth factor alpha，TGFα)对鼠视网膜Müller细胞L-谷氨酸／L-天门冬氨酸转运体(L-glutamate／L-aspartate transporter，GLAST)的调控作用
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目的：研究转化生长因子α(Transforming growth factor alpha，TGFα)对鼠视网膜Müller细胞L-谷氨酸／L-天门冬氨酸转运体(L-glutamate／L-aspartate transporter，GLAST)的调控作用。方法：(1)采用组织块培养方法培养出生后7-10天(P7-10)小鼠视网膜Müller细胞。(2)实验分组：①TGFα干预组：将不同浓度TGFα(50ng／mol，75ng／mol，125ng／mol和150ng／mol)加入鼠视网膜Müller细胞中培养24小时；②对照组：Müller细胞中不加TGFα。(3)采用L-~3H-谷氨酸摄取分析方法研究不同浓度TGFα对Müller细胞GLAST活性的影响。(4)采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析Müller细胞谷氨酸转运体GLASTmRNA表达的差异。(5)采用免疫细胞化学染色方法检测Müller细胞GLAST蛋白质表达的变化。结果：(1)不同浓度的TGFα均能使GLAST对L-~3H-谷氨酸的摄取量增加，并且随着所加入TGFα浓度的增加，L-~3H-谷氨酸的摄取量逐渐增加，当TGFα浓度为125ng／mol时，L-~3H-谷氨酸的摄取量(cpm／mg／ml.pro∶8434.14±191.69)达到最大，是对照组摄取量(cpm／mg／ml.pro∶3166.81±47.50)的266％。(2)不同浓度的TGFα均能上调谷氨酸转运体GLASTmRNA的表达，并且随着TGFα浓度的增加，GLASTmRNA表达量增加，当TGFα浓度为125ng／mol时，GLASTmRNA表达量(0.85±0.13)最大，是对照组表达量(0.20±0.03)的4倍。(3)免疫细胞化学显示GLAST蛋白定位于视网膜Müller细胞胞浆和胞膜中。当TGFα浓度为125ng／mol时，干预组Müller细胞内GLAST蛋白的表达量明显高于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：TGFα可通过上调GLASTmRNA和蛋白质的表达增加视网膜Müller细胞谷氨酸转运体GLAST的摄取活性。
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