青藤碱抗兔动脉粥样硬化作用及免疫机制研究

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目的:建立兔AS动物模型,观察青藤碱抗AS作用,并探讨其可能的作用机制。  方法:1.模型建立及实验分组:本研究采用单纯高脂饲料长期喂养的方法建立动脉粥样硬化兔模型。随机分6组:空白组,模型组,青藤碱低、中、高剂量组,脂必妥对照组。12周后造模成功。空白组(n=8):普通饲料喂养;模型组(n=8):高脂饲料;青藤碱高剂量组:高脂饲料+青藤碱高剂量(109mg/kg.d);青藤碱中剂量组(n=8):高脂饲料+青藤碱中剂量(54.5mg/kg.d)。青藤碱低剂量组(n=8):高脂饲料+青藤碱低剂量(27.25mg/kg.d);脂必妥对照组(n=8)高脂饲料并给药脂必妥(114mg/kg.d)连续三周。2.标本收集及检测:各组兔分别于实验开始前 l天及实验开始后的每周末清晨空腹称量体重;于实验第15周末,经心脏采血,血清检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C-C);检测C反应蛋白(CRP)和丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-а)及前列腺素E2(PGE2)、氧化低密度脂蛋白及其抗体(ox-LDL-C和oxLDL-C-Ab),并观测血液流变学;留取主动脉大体及组织形态学观察、免疫组织化学检测斑块单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达;RT-PCR及 Westernblot法检测 AS组织 COX-2和mPGES-1mRNA和蛋白质的表达。3.统计学处理:应用SPSSl3.0软件进行统计分析。计量资料:体重各组间比较采用重复测量方差分析,血脂采用多元成组方差分析;各组两两比较:采用单因素方差分析,数据结果用均数±标准差(x?s)表示,以P<0.05为差异具有显著性,有统计学意义。  结果:给药青藤碱3周后,AS兔模型体重、血脂水平、血清CRP、TNF-α、MDA、PGE2及ox-LDL-C的量均有下降;ox-LDL-CAb抗体量上升;血液流变学有所改善;AS兔主动脉中MCP-1的表达量下降;AS兔主动脉COX-2和mPGES-1mRNA及其蛋白质的表达下调。  结论:1.青藤碱可降低AS兔体重及血清TC、LDL-C和TG水平,升高HDL-C水平,降低了全血粘度和红细胞聚集指数,发挥降脂、减重和抗凝(预防血栓形成)的作用;  2.青藤碱可降低AS兔血清CRP、TNF-α和PGE2含量,具有抗炎作用;  3.青藤碱降低AS兔血清MDA含量的作用不明显,未发现其抗氧化功能;  4.青藤碱可降低AS兔血清ox-LDL-C的量,并升高其抗体ox-LDL-CAb的含量,具有一定免疫调节作用;  5.青藤碱可抑制AS兔主动脉病变组织MCP-1的表达,发挥其阻止AS进展、稳定斑块的作用;  6.青藤碱可降低AS兔主动脉COX-2和mPGES-1mRNA及其蛋白质的表达,抑制动脉粥样硬化的发生发展。
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