江苏部分集约化养殖场山羊消化道寄生虫监测与球虫、隐孢子虫种类鉴定

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寄生虫病是严重危害养羊业稳定发展的主要因素之一,在世界范围内广泛分布,却一直被忽视。在江苏,肉羊是养殖业中最为重要的产业之一,肉羊生产以山羊为主。虽然寄生虫病被大家广泛认知,但由于其多为隐性感染,临床表现易藏匿于其它疾病之下,严重的麻痹了养殖人员的防范意识。本研究旨在通过对江苏集约化养殖场内山羊消化道主要寄生虫的流行病学调查,以此来摸清江苏集约化养殖场内山羊球虫和隐孢子虫的感染种类和感染情况。2019~2020年,在江苏地区7个市的8个集约化肉羊养殖基地(均为高架床养殖)共采集新鲜的山羊粪便样品446份,经离心沉淀法、网筛过滤法以及饱和盐水漂浮法对山羊消化道寄生虫感染情况进行检测。调查结果显示,消化道寄生虫的总感染率为77.58%(346/446),共检测到三类消化道寄生虫虫卵,分别为球虫、线虫和绦虫,其中球虫为感染优势虫种,感染率为76.91%(343/446)。对不同地区的感染率进行分析,高邮地区的感染率最高,达96.43%(27/28);其次为徐州,为83.33%(20/24)。分析不同季节山羊消化道寄生虫感染情况,夏季感染率最高;将腹泻羊粪便样品和健康羊粪便样品进行球虫感染强度对比,腹泻山羊的感染强度显著高于健康山羊。为了进一步了解山羊艾美耳球虫的感染类型及感染强度,在前期调查的基础上,选择江苏省海门市某集约化山羊养殖场进行重点调查。对该养殖场的山羊按照不同月龄划分后进行粪便样品采集,分析样品检测数据发现青少年山羊的艾美耳球虫感染率要高于羔羊;采用2.5%的重铬酸钾溶液将山羊艾美耳球虫卵囊孢子化后,镜检观察做形态学鉴定,共鉴别出6种山羊艾美耳球虫,分别为阿氏艾美耳球虫(E.arloingii)(78.9%)、雅氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)(72.2%)、约氏艾美耳球虫(E.jolchijevi)(68.9%)、克氏艾美耳球虫(E.chiristenseni)(62.2%)、艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)(42.2%)和家山羊艾美耳球虫(E.hirci)(24.4%),感染优势虫种为阿氏艾美耳球虫和雅氏艾美耳球虫;分析山羊艾美耳球虫感染强度表明,感染强度和动物月龄之间呈反比关系,山羊的月龄越小平均感染强度越高(P<0.05)。在早期的镜检调查过程中,疑似发现了隐孢子虫病原。为了解江苏地区隐孢子虫的流行情况,对前期采集的粪便样品提取粪便全基因组DNA,合成隐孢子虫18S rRNA基因引物后,采用巢式PCR方法对提取到的粪便DNA样品进行扩增,共有20个扩增出隐孢子虫的目的基因,隐孢子虫的总体感染率为4.48%(20/446)。对扩增基因片段回收纯化并测序,目的基因序列经Blast对比分析鉴定隐孢子虫感染的种类和基因型,检测样品的山羊源隐孢子虫虫种为泛在隐孢子虫(C.ubiquitum)和微小隐孢子虫(C.parvum),且与从人类宿主病例中分离到的隐孢子虫株同源关系亲近。调查结果表明,江苏省集约化养殖场内山羊普遍感染消化道寄生虫,以山羊艾美耳球虫为主要优势虫种;山羊隐孢子虫病感染的虫株种类为泛在隐孢子虫(C.ubiquitum)和微小隐孢子虫(C.parvum),其可能会成为人类隐孢子虫病的潜在风险来源。
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