唾液腺腺样囊性癌来源的外泌体促癌机制的相关研究

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目的:比较腺样囊性癌细胞系与舌鳞状细胞癌细胞分泌的外泌体的差异。探讨人唾液腺腺样囊性癌(Salivary adenoid cystic carcinoma,Sacc)不同细胞系分泌的外泌体(exosomes,EXO)对Sacc细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:使用ExoEasy Maxi Kit试剂盒提取外泌体,通过透射电镜观察外泌体形态及直径,纳米粒子跟踪分析(NTA)鉴定外泌体的粒径及检测外泌体浓度,Western Blotting检测外泌体标志性蛋白的表达及半定量分析其在Sacc-83、Sacc-lm、Tscc-25、Tscca不同细胞系间的表达水平。采用CCK-8法、平板克隆形成实验、细胞划痕及Transwell实验检测外泌体对Sacc细胞增殖、迁移及侵袭能力。结果:透射电镜及NTA检测显示:提取的外泌体直径在30-210nm之间,且形态及粒径大小略有差异;Western Blotting检测到不同细胞系分泌的外泌体特异性标志蛋白CD9,CD63及TSG101呈阳性表达,且具有明显差异(P<0.01)。NTA浓度分析显示腺样囊性癌及舌鳞状细胞癌四种细胞系外泌体分泌量具有明显差异性(P<0.01)。CCK-8法及平板克隆实验显示Sacc来源的外泌体可增强其癌细胞增殖能力(P<0.05)。细胞划痕及Transwell实验表明其外泌体可增强癌细胞迁移及侵袭能力(P<0.05)。结论:1.唾液腺腺样囊性癌两细胞株均可分泌EXO,两株细胞间有分泌差异,与舌鳞状细胞癌永生化细胞系相比,在形态、粒径大小、特异性蛋白及外泌体分泌量具有一定差异性。2.唾液腺腺样囊性癌外泌体可增强其癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。
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