鼠李糖乳杆菌超声提取物对牙龈卟啉单胞菌LPS作用下的MC3T3-E1细胞活性及成骨活性影响的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hsmk888
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目的:本研究选用革兰氏阴性菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)的内毒素脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)作用于成骨细胞样MC3T3-E1细胞模拟牙周炎的病理状态,体外分析鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)超声提取物对牙龈卟啉单胞菌LPS作用下的MC3T3-E1细胞活性和成骨分化的影响,从而探讨LGG超声提取物对牙周炎潜在的治疗作用。材料方法:1、以MTT法检测LGG超声提取物对MC3T3-E1细胞活性的影响、LGG超声提取物对牙龈卟啉单胞菌LPS作用下的MC3T3-E1细胞活性的影响;2、以平板划痕试验检测LGG超声提取物对MC3T3-E1细胞迁移能力的影响,以及LGG超声提取物对牙龈卟啉单胞菌LPS作用下的MC3T3-E1细胞迁移能力的影响;3、以碱性磷酸酶染色法(Alkaline phosphatase stain,ALP)检测LGG超声提取物对MC3T3-E1细胞内ALP活性的影响,以及LGG超声提取物对牙龈卟啉单胞菌LPS作用下的MC3T3-E1细胞内ALP活性的影响;4、Western blotting检测LGG超声提取物对MC3T3-E1细胞内Osterix表达的影,以及LGG超声提取物对牙龈卟啉单胞菌LPS作用下的MC3T3-E1细胞内Osterix表达的影响。实验分组:LGG超声提取物对MC3T3-E1细胞作用的实验分组为:LGG(0.025 mg/m L、0.05 mg/m L、0.1 mg/m L)组和对照组;牙龈卟啉单胞菌LPS参与下,LGG超声提取物对MC3T3-E1细胞的影响的实验分组为:LPS+LGG(0.025mg/m L、0.05 mg/m L、0.1 mg/m L)、LPS和对照组。结果:1、LGG超声提取物对MC3T3-E1无细胞毒性,呈浓度和时间依赖性促进MC3T3-E1细胞增殖,而且削弱了牙龈卟啉单胞菌LPS对MC3T3-E1细胞活性的抑制效应(P<0.05);2、LGG超声提取物呈浓度依赖性促进MC3T3-E1细胞迁移能力(排除时间因素),较高浓度的提取物削弱了牙龈卟啉单胞菌LPS对MC3T3-E1细胞迁移的抑制效应(P<0.05);3、浓度为0.05 mg/m L、0.1 mg/m L的LGG单独处理增强MC3T3-E1细胞ALP活性(P<0.05,P<0.01),而且浓度为0.1 mg/m L的LGG超声提取物削弱了牙龈卟啉单胞菌LPS对MC3T3-E1的ALP活性的抑制效应(P<0.05);4、0.1 mg/m L的LGG超声提取物单独处理促进MC3T3-E1细胞的Osterix表达(P<0.05),而且浓度为0.1 mg/m L的LGG超声提取物削弱了牙龈卟啉单胞菌LPS对MC3T3-E1细胞Osterix表达的抑制效应(P<0.05)。结论:LGG超声提取物促进了MC3T3-E1细胞活性和成骨分化能力,削弱了牙龈卟啉单胞菌LPS对MC3T3-E1细胞活性和成骨分化能力的抑制效应。
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