木糖醇(xylitol)作为一种新型的功能甜昧剂，无任何毒副作用，具有抗龋齿作用，使用越来越广泛。目前生产木糖醇的的化学合成法存在生产成本大、容易对环境造成污染等缺点。因此很有必要研究一种生成成本低无污染的生物合成方法。本研究首先从弱氧化醋酸杆菌、氧化葡萄糖杆菌以及克雷伯肺炎球菌中分别克隆D-5可拉伯糖醇脱氢酶基因，通过对这三种基因在大肠杆菌中的表达、体外酶学性质的研究，发现它们均能将D-阿拉伯糖醇氧化为D-木酮糖。由于来源于克雷伯肺炎球菌的D-阿拉伯糖醇脱氧酶底物作用范围最为狭窄，只能氧化D-阿拉伯糖醇以及甘露醇，而其它两种D-阿拉伯糖醇脱氢酶的底物作用范围很广泛。因此，将DalD基因克隆到巴氏酵母表达载体pPIC9K中，其中pPIC9K载体中的启动子用巴氏酵母自身的三磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAP)的启动子代替其甲醇氧化酶基因的启动子。然后将DalD基因多拷贝整合到巴氏酵母基因组中。构建了能够直接将葡萄糖发酵成木糖醇的基因工程菌-巴氏酵母PX114。该工程菌能够在含有15—30％的葡萄糖的YPD培养基中良好生长，发酵48小时后就能够从发酵上清中检测到木糖醇的积累；其中在含20％葡萄糖浓度的培养基中发酵至96小时时木糖醇的含量可以达到最高为1.32％的产量，转化率为每100克葡萄糖产生6.6克木糖醇。开辟了一条利用葡萄糖为原料生物合成木糖醇的途径。