生物钟系统的正常运行对人类的健康具有非常重要的作用。生物钟紊乱会导致失眠、免疫力降低甚至产生包括代谢综合征以及导致癌症在内的各种疾病。此外,健康人体的血压也具有节律性,而血管的收缩及松弛由血管平滑肌细胞所控制,因此探究血管平滑肌细胞的生物节律对维持人体血压稳态与机体健康具有重要意义。基于此,本课题建立了Ang Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞生物钟基因节律模型,利用Real-Time PCR、Western Blot、转录组测序及生物节律荧光检测等手段,探究EGCG对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞生物钟基因节律模型的调控作用。本研究取得的主要结果如下:1、利用qPCR方法研究EGCG对Ang Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞生物钟基因节律的调控作用。结果表明:EGCG会显著降低Bmall、Per2、Cry1、Rev-erbα这四种生物钟基因节律的振幅,并且延长节律周期,对它们的节律相位也会起到延后的调控作用。2.通过Western blotting检测主生物钟蛋白BMAL1,以及基因节律性表达明显的REV-ERB α蛋白表达节律。结果表明:EGCG会显著延长BMAL1与REV-ERBα蛋白节律的周期,下调节律振幅并且使相位往后推移。3.基于转录组测序的结果,对差异表达基因进行KEGG信号通路富集分析,发现EGCG下调了除Dec1与Dec2以外所有富集在生理节律信号通路中的差异表达基因的表达量。结果表明,EGCG调控的生物钟基因节律的潜在机制为:刺激Dec1与Dec2的高表达,使翻译出的相应蛋白对BMALI-CLOCK异质二聚体的转录激活作用的负调控增强,从而调控其他生物钟基因的节律。4.对PER2::LUCIFERASE定点敲入小鼠主动脉血管与肠系膜动脉血管生物节律荧光检测,实验结果表明在体外培养的组织中EGCG同样会对PER2蛋白的节律产生降低节律的振幅,延长节律周期,并对节律相位也起到延后的调控作用