一个拟南芥扁平细胞突变体e83的研究

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植物的叶扁平细胞形状不规则,相邻细胞通过凸起和凹陷互相嵌合形成一个连续的表面。扁平细胞与气孔保卫细胞、表皮毛共同构成了植物最外层具有防御及气体交换功能的表皮。拟南芥叶扁平细胞的形态发生受一系列机制调控,包括扁平细胞的分布、形状及大小的确定等,影响这些机制的因素可能导致扁平细胞形态的非正常发生。本论文以拟南芥为实验材料,用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变野生型Col-0种子,通过印迹技术筛选得到一个拟南芥莲座叶下表皮细胞突变体e83,其下表皮中存在巨大扁平细胞,我们将这个特征作为e83突变体最明显、最直观的表型。这种巨大扁平细胞面积较大,通常可达同时期野生型植株扁平细胞面积的十余倍;同时,这种巨大扁平细胞的存在比例约占总表皮细胞数目的5-10%。另外,与同时期的野生型相比,e83的根尖长度变短,细胞数目减少,根尖细胞长度变大;e83突变体莲座叶左右不对称;突变体的萌发、抽薹、开花及果荚成熟时间均出现了一周延迟。另外,e83突变体的果荚明显变短、形态扭曲,其种子育性降低,还有对生现象;成熟的突变体植株较矮等。根据e83莲座叶巨大扁平细胞的表型,通过筛选e83×Ler F2植株中的e83纯合体,用图位克隆技术对e83突变基因进行定位。筛选、验证约2000株e83纯合体,将突变区间缩小至1号染色体左端的2354 kb-2660 kb处,分析区间每个基因的特性及功能后,本实验初步确定了e83突变体中一个编码DNA聚合酶亚基的基因发生了突变,观察两个已经发现的该基因的突变体莲座叶表皮细胞,发现也有巨大扁平细胞存在。
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