灵芝胞外多糖反馈抑制作用机制的初步研究

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本文首先应用比较实验和正交实验的方法建立了一个研究用的合成培养基配方,并优化了主要培养条件。配方为葡萄糖35g/L、(NH4)2SO43.34g/L、KH2PO4·7H2O1.5g/L、MgSO40.5g/L、FeSO4·7H2O0.02g/L,pH自然;培养条件为500mL的三角瓶,装液量为100mL,接直径12mm的平板种10块,30℃,120r/min,培养时间为9天。从而在提高灵芝胞外多糖产量的同时,避免了培养基成分对研究发酵动力学的干扰,为研究灵芝真菌发酵动力学及胞外多糖反馈抑制机制提供了条件。 接着有效地提取、分离和纯化了灵芝深层发酵所产生的胞外多糖,用该产物进行反馈抑制试验,进一步验证了灵芝胞外多糖具有反馈抑制作用,结果表明当培养基中添加的同源胞外多糖大于0.5769g/L时,灵芝胞外多糖的分泌受到明显抑制,当培养基中添加的同源胞外多糖的浓度达到2.316g/L时,灵芝胞外多糖的分泌完全被抑制。与本室宋频然的研究结果差异不显著,由此建立了用该产物进行反馈抑制强度测试的操作程序。 最后用乙醇分部沉淀法对既得的灵芝胞外多糖进行分子量大小分级,将所得不同级分输入既定反馈抑制强度测试程序,比较不同多糖级分的反馈抑制强度。结果表明灵芝胞外多糖反馈抑制作用的有无和强弱与胞外多糖的分子量大小密切相关。
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