【摘 要】
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为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb)，本研究利用血清型1型蓝舌病病毒(BTVI)免疫BALB／c鼠，4次免疫后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0进行融合，并用BTVl包被ELISA板，通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTVl的MAb的杂交瘤细胞株(2810、3D4、4H8)。利用表达BTVl主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后，对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／农业部兽医公共卫生重点开放实验室，黑龙江哈尔滨 150001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会
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为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb)，本研究利用血清型1型蓝舌病病毒(BTVI)免疫BALB／c鼠，4次免疫后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0进行融合，并用BTVl包被ELISA板，通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTVl的MAb的杂交瘤细胞株(2810、3D4、4H8)。利用表达BTVl主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后，对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光(IFA)以及Western blot鉴定，结果显示：2810和4H8与VP7蛋白反应，而3D4与VP6蛋白反应。进一步利用IFA对3株MAb的反应特异性进行鉴定，结果表明3株MAb与24个血清型的BTV均可反应。本实验室制备所得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础。
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