【摘 要】
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为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb),本研究利用血清型1型蓝舌病病毒(BTV1)免疫BALB/c鼠,4次免疫后取小鼠脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并用BTV1包被ELISA板,通过间接
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室; 东北农业大学 动物医学学院; 湖南农业大学 动物医学学院;
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为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb),本研究利用血清型1型蓝舌病病毒(BTV1)免疫BALB/c鼠,4次免疫后取小鼠脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并用BTV1包被ELISA板,通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTV1的MAb的杂交瘤细胞株(2B10、3D4、4H8)。利用表达BTV1主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后,对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光(IFA)以及Western blot鉴定,结果显示:2B10和4H8与VP7蛋白反应,而3D4与VP6蛋白反应。进一步利用IFA对3株MAb的反应特异性进行鉴定,结果表明3株MAb与24个血清型的BTV均可反应。本实验室制备所得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础。
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