基于渗透压平衡和元素供应的隐甲藻分批式高密度发酵研究

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隐甲藻为一种海洋微生物,是常用的DhA生产菌。本文以实验室保藏的隐甲藻为研究对象,在高初糖浓度下,考察隐甲藻对培养环境渗透压条件的耐受性并确定最适渗透压条件为1715.46 mOsm·L-1,以此渗透压为基础,从碳、氮、磷、硫四种元素供应角度优化隐甲藻生长环境。结果表明,在碳元素64g/L,氮元素2.58g/L,硫元素2.668g/L,磷元素0.912g/L 条件下,细胞干重达56.5g/L,,脂肪酸占细胞干重在 31%左右,DhA 占总脂肪酸含量35.34%,DhA 含量达6.189g/L。
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设计分步导入洗脱程序,对脐血造血干/祖细胞进行玻璃化低温保存。对照组采用10%DMSO,1℃/min降温速率对细胞进行慢冻保存。利用冷台对保护剂的玻璃化过程进行可视化研究。复苏后细胞用台盼蓝拒染法计活率,并用流式细胞仪对CD34+细胞进行表面抗原鉴定计数。结果表明:联合玻璃化保护剂在降温速率和复温速率均为100℃/min时,可以实现完全玻璃化,且仅有轻微短暂的反玻璃化现象。五步导入保护剂,每步平衡
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