【摘 要】
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构建能高效表达L-ATC水解酶的重组菌。用PCR方法扩增假单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因片段，将该DNA片段插入T载体上测序得到522bp的DNA序列；将此序列插入表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,重组菌在0.5mmol/LIPTG诱导5h后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白分子量为20.3kD。所构建的表达菌株用于转化DL-ATC,以DTNB法检
【机 构】
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浙江工业大学生物制药研究所,浙江 杭州 310032 浙江树人大学生物与环境学院,浙江 杭州 31
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构建能高效表达L-ATC水解酶的重组菌。用PCR方法扩增假单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因片段，将该DNA片段插入T载体上测序得到522bp的DNA序列；将此序列插入表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,重组菌在0.5mmol/LIPTG诱导5h后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白分子量为20.3kD。所构建的表达菌株用于转化DL-ATC,以DTNB法检测转化率达83.65％。L-ATC水解酶在大肠杆菌中实现了高效表达,获得了具有生物转化活性的L-ATC水解酶重组蛋白。
其他文献
以2,4-二硝基苯酚光催化降解为探针反应,考察了BiVO4的光催化降解活性。利用正电子湮没谱(寿命谱)分析了焙烧温度对BiVO4 光催化活性的影响,结果表明焙烧温度能引起特定的缺陷数目变化,改变了光催化剂的微观结构。经900℃焙烧的BiVO4催化剂比经其它焙烧温度下的催化剂有较多的表面缺陷数目,可产生表面光生电子-空穴的数目较多,不均匀性、缺陷位的电子密度大,使得其光催化氧化活性增强,即2,4-二
微生物湿法冶金具有低能耗、环保和高效等优点。槽浸与堆浸是两种目前工业常用的技术。影响槽浸生物氧化效率的因素有很多,其中槽浸技术中矿浆的流变学特征与反应器系统内流体流动、混合和传热效率直接相关。实验采用哈克RS600 流变仪测定了难处理金精矿矿浆流变特性,探讨了剪切速率、固相浓度、粒径大小分布和温度等因素对矿浆流变学特征的影响规律。本实验结果表明:较低固含率时矿浆呈现牛顿流体特征,在较高固含率下呈现
采用浸渍法制备了CuO/ZrO2催化剂,以Ch4催化燃烧为模型反应考察了活性组分Cu的含量对催化剂性能的影响,并采用N2吸附、程序升温还原、X 射线衍射对催化剂进行了表征。实验结果表明,铜含量为5 wt％的Cu5/ZrO2催化剂具有最好的低温活性和稳定性。结合 BET、TPR及XRD表征结果可知,随着活性组分铜含量的增加,催化剂的比表面积在铜含量为5 wt％时达到最大值(84.59 m2.g-1)
通过溶胶凝胶法制备了负载型磷化钼催化剂前体,首次以氢氮混合气为还原剂实现了磷化钼催化剂的常压制备,以噻吩的正己烷溶液为模型化合物,考察磷化钼催化剂的活性。结果表明: 当磷化钼在载体上的担载量为25％、磷钼比为1:1、焙烧温度为500℃、氢氮比为1:9、还原气空速为2400h-1、还原终温为550℃时催化剂比表面积最大,可达103.453m2/g；以噻吩转化率为实验指标,经单因素实验、正交实验得出磷
通过筛选,得到了一种用于非均相催化一步合成碳酸二苯酯(DPC)所需的载体(Ce1-xMnxO2),以PdCl2为活性钯源,通过沉淀法负载活性组分,制备出0.5％Pd/Ce1-xMnxO2催化剂。采用XRD、SEM、BET等手段对载体及催化剂进行了表征。考察了载体制备方法、金属离子配比及载体焙烧温度对催化剂活性的影响。研究结果表明,采用溶胶-凝胶法,并且Ce:Mn摩尔比为1:1,载体在600℃下焙烧
采用无水AlCl3催化剂,进行了桥式四氢双环戊二烯异构化合成挂式四氢双环戊二烯反应的反应机理与动力学模型研究。考察了溶剂种类、溶剂比、反应温度对反应转化率的影响,获取了最优反应条件。分析了异构化反应过程机理,在排除内外扩散的影响下,建立了该过程反应的本征动力学模型。研究结果表明:该反应为一级反应,其反应活化能为116/kJ mol,指前因子为3.39×1013。最后,通过剂料比、催化剂用量等参数对
在不锈钢高压釜中,对甲烷部分氧化反应液蒸馏得到的硫酸二甲酯进行了热分解研究。硫酸二甲酯在高温下部分分解为三氧化硫和二甲醚,此反应为可逆反应。本文进行了分解温度、分解压力、搅拌速率、及甲烷参与的硫酸二甲酯分解等工艺条件的考察。分解的最优条件为220℃,N2压力2MPa,硫酸二甲酯的转化率为40.1％,目的产物选择性为30.2％；甲烷压力2MPa,硫酸二甲酯的转化率为72.2％,目的产物选择性为80.
本文研究了以Fe2(SO4)3/TEA/NaOH为媒质体系间接电化学还原靛蓝的工艺条件及动力学。采用恒流法还原靛蓝,以在线光谱仪监测反应过程,探讨不同反应条件对还原的影响。研究结果表明,当还原靛蓝浓度为0.02g·L-1时,最佳反应条件为:电流密度3mA·cm-2，Fe2(SO4)3浓度0.004mol·L-1,温度50℃,pH值14,TEA浓度0.15 mol·L-1。当满足一定的电流密度和媒质
在固定床反应器研究了熔铁催化剂超临界费托合成反应中介质对反应物和产物扩散的影响。发现超临界介质使反应物和产物的扩散速率增加,使合成气在催化剂表面浓度增加，使产物能及时从催化剂表面脱附并传递出催化剂孔道。故与气相反应相比较,超临界费托合成反应使CO转化率提高,烯烃选择性增加,甲烷选择性下降。
本文采用共浸渍法制备了K2MoO4-NiO/SiO2催化剂,考察了NiO对高硫合成气制甲硫醇K2MoO4/SiO2催化剂的影响。活性评价结果表明,添加了NiO的催化剂活性有很大的提高，当Ni/Mo 比为1/18时,CO 转化率为68.1％,较未添加NiO的催化剂提高了近一倍。TPR表征显示,添加的NiO 与Mo有强相互作用,促进了Mo 物种的还原。ESR表征显示,反应后的催化剂中可检测到“oxo-