运动发酵单胞菌CRISPR/Cas系统的功能分析

来源 :2015中国遗传学会大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RaymanL
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  运动发酵单胞菌(Zymononas mobilis)是一个革兰氏阴性细菌,由于其代谢特点一乙醇产率高和生物质少,被广泛用于发酵生产燃料乙醇的研究.目前已有多个菌株测序了基因组,发现在染色体中均存在多个CRISPR重复序列,并与cas基因簇分离,根据编码的Cas蛋白,该CRISPR/Cas系统可归类于I-F类型,但质粒中也存在其它类型的CRISPR/Cas系统.为了确证Z.mobilis中CRISPR/Cas系统的免疫功能,我们利用质粒"入侵"等方法分析了ZM4菌株中CRISPR/Cas系统的功能.根据前期ZM4菌株的转录组芯片数据,可确认6个cas基因均能转录,而且可能是组成性表达;通过分离ZM4菌株常规培养细胞的总RNA,通过RT-PCR分析,确定了CRISPR的转录方向,同时也证实了CRISPR重复序列能够转录.
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