一株犬瘟热病毒H基因T193I突变株的分离鉴定及序列分析

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ccxdnk
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为对吉林省地区犬瘟热病毒(CDV)流行发病情况调查,本研究从吉林省长春市、吉林市、四平市的养犬场、毛皮动物养殖场、宠物医院共收集12份经胶体金试纸条检测为CDV阳性的肺部样品,利用Vero/DogSLAM细胞进行病毒分离培养,并对分离的病毒经PCR鉴定、间接免疫荧光试验确定该病的致病病原病毒分型鉴定和H基因的遗传进化分析,并且选取1株犬源CDV病毒感染6只2~3月龄的幼犬进行动物回归试验,每天观察试验犬的临床症状、测量体温、采集眼鼻、肛拭子,拭子经PCR检测CDV的粪便排毒情况。结果显示,有1株犬源样品在Vero/DogSLAM细胞上盲传第4代出现明显的CPE,毒价达104.56TCID50/mL,经PCR鉴定结果表明分离出1株犬源CDV,命名MHK-04;病毒的分型鉴定结果表明,分离的MHK-04为Asia-I型;对MHK-04毒株的H基因的同源性分析结果表明,MHK-04株为Asia-I型,与广东分离株GD1818株的同源性最高,与疫苗株(Onderstepoort和CDV3)差异较大,核苷酸同源率均为90.1%,氨基酸同源率分别为90.0%和90.1%;经SWISS-MODEL预测H蛋白三维立体模型结果表明,MHK-04株H蛋白氨基酸序列T193I突变位点,位于H蛋白的外部结构中β6S4位,是其起始位点,推测T193I点突变与H蛋白的构像改变及SLAM受体亲和力有关,有待进一步验证;动物回归试验结果显示,MHK-04毒株在感染幼犬后,幼犬出现犬瘟热发病症状,体温在第4 d升高到41.4度,并出现排毒现象。本研究为了解吉林地区CDV的流行规律及疾病的诊断、防治提供参考。
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