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目的
研究miR-485-3p是否通过靶向TLR1对胃癌细胞放射敏感性起作用。
方法分别用qRT-PCR和蛋白印迹法检测miR-485-3p和TLR1的表达变化，DIANA、TargetScan和miRanda软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-485-3p对TLR1的靶向作用。将miR-485-3p mimic或TLR1 siRNA转染到胃癌MGC803细胞中，放射处理细胞，凋亡实验、克隆形成实验和MTT检测细胞放射敏感性的变化。双荧光素酶报告实验检测miR-485-3p上调和TLR1沉默对NF-κB活性的影响。蛋白免疫印迹实验探究miR-485-3p上调和TLR1沉默对NF-κB靶基因的影响。
结果放射处理后胃癌细胞miR-485-3p表达下调，TLR1表达上调。靶基因预测软件发现TLR1可能是miR-485-3p的靶基因，双荧光素酶报告实验进一步验证了TLR1是miR-485-3p的直接靶点。miR-485-3p负调控TLR1的表达。miR-485-3p的过表达提高了细胞凋亡率，降低了细胞克隆形成和细胞群体增殖能力，增强了细胞的放射敏感性，且TLR1的沉默也具有相同作用。miR-485-3p上调和TLR1沉默均降低了NF-κB的活性，下调了NF-κB多个靶基因的表达。
结论miR-485-3p可能通过靶向TLR1调控NF-κB信号通路增强胃癌细胞的放射敏感性。