【摘 要】
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目的 比较酶切连接和无缝克隆方法在构建pCGS3-CK载体上的优缺点，为寡核苷酸片段载体的构建提供参考。方法 酶切连接是需要合成两条互补的寡聚核苷酸单链，然后经过退火形成具有黏性末端的双链结构片段，在DNA连接酶的作用下与具有相同酶切的线性化载体连接，形成环状质粒。无缝克隆是在目标序列两端各加上15～20个与载体序列同源性的碱基，然后经过退火形成双链结构的目的片段，在重组酶的作用下与线性化的载体连
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目的 比较酶切连接和无缝克隆方法在构建pCGS3-CK载体上的优缺点，为寡核苷酸片段载体的构建提供参考。方法 酶切连接是需要合成两条互补的寡聚核苷酸单链，然后经过退火形成具有黏性末端的双链结构片段，在DNA连接酶的作用下与具有相同酶切的线性化载体连接，形成环状质粒。无缝克隆是在目标序列两端各加上15～20个与载体序列同源性的碱基，然后经过退火形成双链结构的目的片段，在重组酶的作用下与线性化的载体连接，形成环状质粒。结果 从阳性率角度进行比较，酶切连接的阳性率为95.65%，而无缝克隆的阳性率为89.13%。结论 与无缝克隆方法相比，用酶切连接方法构建寡核苷酸片段载体阳性率高，实验成本低。
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黑参是以人参为起始原料,经反复蒸制、烘干而成的炮制品。具有肝肾保护、神经保护、抗癌、抗衰老等药理活性。人参皂苷类成分是其主要活性物质。与白参、红参不同,黑参中人参皂苷Rg3、（20R）-Rg3、Rs3、（20R）-Rs3、Rk1、Rg5、Rh2、（20R）-Rh2、CK等稀有皂苷的含量大大提高。国内外对黑参的化学成分研究集中在单体皂苷鉴定和含量测定两个方面,生物活性研究集中在水/醇提取物以及单体人
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