探究甘氨酸脱氢酶(GLDC)基因通过PI3K/Akt/mTOR调控卵巢癌细胞增殖与凋亡的机制。
方法采用RNA干扰技术沉默卵巢癌HEY、SK-OV-3细胞中GLDC的表达,分别将细胞分为si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组,si-control组为转染siRNA-control的细胞,si-GLDC#1组为转染siRNA-GLDC#1的细胞,si-GLDC#2组为转染siRNA-GLDC#2的细胞。采用蛋白质印迹法检测GLDC蛋白表达水平以及PI3K/Akt/mTOR蛋白磷酸化水平,分别采用CCK-8法、Transwell小室迁移实验、细胞划痕实验和流式细胞仪检测细胞增殖、迁移和凋亡能力。
结果GLDC在卵巢癌HEY细胞si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组中的相对表达量分别为1.00±0.01、0.68±0.10、0.80±0.08,差异有统计学意义(F=13.80,P=0.006);GLDC在卵巢癌SK-OV-3细胞si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组中的相对表达量分别为1.02±0.01、0.58±0.17、0.60±0.25,差异具有统计学意义(F=6.08,P=0.036)。si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组3组HEY细胞培养24 h后吸光度(A)值分别为1.04±0.03、0.91±0.02、0.82±0.01,48 h后分别为1.53±0.13、1.30±0.03、1.29±0.07,72 h后分别为1.44±0.08、1.25±0.01、1.15±0.03,差异均具有统计学意义(F=83.14,P