【摘 要】
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目的:研究环状RN A(circular RNAs,circRNAs)circZFR是否通过调控微小RNA(microRNA,miRNA/miR)-497-5p的表达影响脊索瘤细胞增殖、迁移及侵袭.方法:实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测脊索瘤组织中 circZFR 和 miR-497-5p 的表达.在脊索瘤 U-CH1 细胞中转染 si-circZFR 或 miR-497-5p.噻唑蓝(methyl
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科,广西 南宁 530021;广西医科大学附属武鸣医院骨科,广西 南宁 530199
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目的:研究环状RN A(circular RNAs,circRNAs)circZFR是否通过调控微小RNA(microRNA,miRNA/miR)-497-5p的表达影响脊索瘤细胞增殖、迁移及侵袭.方法:实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测脊索瘤组织中 circZFR 和 miR-497-5p 的表达.在脊索瘤 U-CH1 细胞中转染 si-circZFR 或 miR-497-5p.噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖,Tr-answell小室法检测细胞迁移及侵袭情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotease-9,MMP-9)蛋白表达,StarBase预测工具和双荧光素酶报告实验分析circZFR与 miR-497-5p的靶向结合.si-circZFR和anti-miR-497-5p共转染,观察下调miR-497-5p表达对沉默circZFR表达诱导的U-CH1细胞增殖、迁移及侵袭的作用.结果:与髓核组织比较,脊索瘤组织中的circZFR表达量明显增加,miR-497-5p表达量显著减少(P＜0.05).沉默circZFR表达或过表达miR-497-5p明显降低U-CH1细胞48 h、72 h的细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量,显著提高p21蛋白水平(P＜0.05).circZFR靶向调控miR-497-5p的表达.下调miR-497-5p表达逆转了沉默circZFR表达对脊索瘤U-CH1细胞增殖、迁移、侵袭、CyclinD1、MMP-2及MMP-9蛋白表达的抑制作用,和对p21蛋白表达的促进作用.结论:沉默circZFR表达可以抑制脊索瘤细胞的增殖、迁移及侵袭,其作用机制与靶向调控miR-497-5p的表达有关.
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