呕吐毒素降解微生物的筛选及应用

来源 :东北农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahmat716
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为分离筛选可高效降解呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)的细菌,以期在粮食DON生物降解中应用.采用DON为唯一碳源的无机盐培养基作为富集驯化培养基,从鸡肠、鱼肠及土壤样品中富集培养可降解DON的混合菌,并逐一对分离单菌进行DON降解能力检测,获得降解效果最佳菌株.结果 表明:JC-5菌株在无机盐培养基中DON降解效果显著高于其他菌株,12h、24 h、36 h内的降解率依次为56.56%、91.12%、96.97%;将JC-5添加到DON污染的面粉中,其在12h、24h、36 h内对DON的降解率依次为50.32%、84.84%和90.66%.经形态学、生理生化特征、分子生物学鉴定,该菌株为江都丛毛单胞菌(Comamonas jiangduensis).与现有DON降解菌相比,该菌株具有降解效率高、降解效果好,可有效降解面粉中DON的优点.可为进一步开发粮食中霉菌毒素的高效降解途径研究奠定基础.
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本研究克隆马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)衣壳蛋白(Coat Protein,CP)基因,改造其密码子,使其偏好原核表达,构建pCzn1-PLRV CP重组表达载体,通过大肠杆菌表达纯化,经Western Blot方法鉴定为PLRV CP蛋白,纯化后的蛋白免疫日本大耳兔,成功制备PLRV CP蛋白多克隆抗体,识别重组蛋白效价为128000倍,识别PLRV叶片的效价为32000倍,经Western Blot方法分析,其特异性良好.本研究为PLRV检测方法的建立及脱毒种薯
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