【摘 要】
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[目的]探索肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-α, TNF-α）对人髓核间充质干细胞的衰老的影响。[方法]分离培养第三代正常人髓核间充质干细胞（human nucleus pulposus mesenchymal stem cells, HNPMSCs），分为空白对照组和TNF-α组，分别加入无血清培养基与TNF-α浓度为100 ng/ml的无血清培养基干预48 h。
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（编号：81960407）； 江西省青年科学基金项目（编号：20171BAB215026）；
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[目的]探索肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-α, TNF-α）对人髓核间充质干细胞的衰老的影响。[方法]分离培养第三代正常人髓核间充质干细胞（human nucleus pulposus mesenchymal stem cells, HNPMSCs），分为空白对照组和TNF-α组，分别加入无血清培养基与TNF-α浓度为100 ng/ml的无血清培养基干预48 h。镜下观察细胞形态，并用细胞衰老β半乳糖苷酶试剂盒染色，对细胞衰老情况进行观察；CCK-8检测第1、3、5、7、9、11、13、15 d后的细胞增殖活性；Western Blot检测衰老相关蛋白P53、P16表达情况。[结果]镜下观察及β半乳糖苷酶染色均可见TNF-α组细胞呈衰老状态。CCK-8检测，随时间推移两组细胞CCK-8检测光密度（optimal density, OD）值均显著增加（P＜0.05）。相应时间点两组间比较，第1～7d，两组间的人NPMSCs增殖活性OD值的差异无统计学意义（P＞0.05）；而第9～15 d,TNF-α组的人NPMSCs的OD值均显著低于空白对照组（P＜0.05）。Western Blot检测显示TNF-α组衰老相关蛋白P53、P16的表达显著高于空白对照组（P＜0.05）。[结论] TNF-α能够抑制人NPMSCs的生物学活性，加速细胞衰老。
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