【摘 要】
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目的：探讨骨化三醇[1,25（OH）2D3]联合黄芪多糖（APS）对骨骼肌细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用及其作用机制，为采用1,25（OH）2D3和APS缓解IR提供依据。方法：采用CCK-8法和己糖激酶法确定棕榈酸（PA）溶液(0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol·L-1)的最佳作用剂量和最佳作用时间、APS (25、50、100和200 mg·L-1)最佳作用剂量及1,25（OH
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室
【基金项目】
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吉林省科技厅科研项目（20210204024YY）；
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目的：探讨骨化三醇[1,25（OH）2D3]联合黄芪多糖（APS）对骨骼肌细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用及其作用机制，为采用1,25（OH）2D3和APS缓解IR提供依据。方法：采用CCK-8法和己糖激酶法确定棕榈酸（PA）溶液(0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol·L-1)的最佳作用剂量和最佳作用时间、APS (25、50、100和200 mg·L-1)最佳作用剂量及1,25（OH）2D3(1、10、100和1 000 nmol·L-1)最佳作用剂量。将骨骼肌细胞分为对照组（不进行任何处理）、PA组(给予0.4 mmol·L-1PA作用24 h)、PA+APS组(给予0.4 mmol·L-1PA作用24 h后再给予100 mg·L-1APS作用24 h)、PA+1,25（OH）2D3组[给予0.4 mmol·L-1PA作用24 h后再给予100 nmol·L-11,25（OH）2D3作用24 h]、PA+APS+1,25（OH）2D3组[给予0.4 mmol·L-1PA作用24 h后再给予100 mg·L-1APS和100 nmol·L-11,25（OH）2D3作用24 h]。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清中白细胞介素6 （IL-6）、白细胞介素10 （IL-10）、单核细胞趋化蛋白1 （MCP-1）和肿瘤坏死因子α （TNF-α）水平，流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，Western blotting法检测各组细胞中胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、磷酸化胰岛素受体底物1 （p-IRS-1）、葡萄糖转运蛋白4 （GLUT4）、P65、磷酸化P65 （p-P65）、P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和Toll样受体4 （TLR4）蛋白表达水平。结果：与对照组比较，PA组骨骼肌细胞中ROS、IL-6、TNF-α、MCP-1水平和P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均升高（P＜0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均降低（P＜0.05）；与PA组比较，PA+APS、PA+1,25（OH）2D3和PA+APS+1,25（OH）2D3组细胞中ROS、 IL-6、 MCP-1和TNF-α水平及P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均降低（P＜0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均升高（P＜0.05）。PA+APS+1,25（OH）2D3组细胞中ROS水平、p-P65和p38MAPK蛋白表达水平均低于PA+APS和PA+1,25（OH）2D3组（P＜0.05）,InsR、IRS-1、p-IRS-1和GLUT4蛋白表达水平均高于PA+APS和PA+1,25（OH）2D3组（P＜0.05）。结论：1,25（OH）2D3联合APS可有效减轻IR，其机制可能是通过抑制氧化应激通路以及炎性因子的释放来实现的，且联合应用效果优于单独应用。
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