【摘 要】
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目的:通过建立体外血脑屏障(blood brain barrier,BBB)模型,探讨人肺腺癌PC-9细胞在CXCR4/SDF-1轴作用下对BBB紧密连接蛋白的影响.方法:利用永生化的小鼠脑微血管内皮细胞Ben
【机 构】
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福建医科大学省立临床医学院福建省立医院呼吸与危重症医学科,福建福州350001福建医科大学省立临床医学院福建省立医院福建省呼吸病研究所,福建福州350001;福建医科大学省立临床医学院福建省立医院福建
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目的:通过建立体外血脑屏障(blood brain barrier,BBB)模型,探讨人肺腺癌PC-9细胞在CXCR4/SDF-1轴作用下对BBB紧密连接蛋白的影响.方法:利用永生化的小鼠脑微血管内皮细胞Bends进行单层培养,建立体外BBB模型;通过跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)测定及荧光素钠通透性实验判定体外BBB模型的功能状态以及观察PC-9细胞对体外BBB模型功能的影响.Western blotting检测PC-9细胞在CXCR4抑制剂AMD3100、SDF-1单独或联合(1 μg/ml AMD3100,100 ng/ml SDF-1,AMD3100+SDF-1)作用下对BBB模型功能和内皮细胞紧密连接蛋白表达的影响,Transwell迁移实验检测CXCR4/SDF-1轴对PC-9细胞跨BBB模型细胞层迁移能力的影响.结果:Bends细胞单层培养可形成紧密连接的“屏障”并产生较高的TEER,第96 h达到(182.13±5.19)Ω·cm2;同时行荧光色钠通透性实验结果显示,BBB具有良好屏障性能,其通透率低于空白对照组(P＜0.05).PC-9细胞作用后,BBB模型TEER逐渐降低,第24 h降至(46.7±4.35)Ω·cm2;同时BBB通透率较作用前显著提高(P＜0.05).PC-9细胞在AMD3100作用下能够上调内皮细胞紧密连接蛋白的表达(P＜0.05);AMD3100处理组的PC-9细胞穿过BBB的细胞数较空白组明显减少[(43±2)vs(81±2)个,P＜0.05].结论:AMD3100能够减弱PC-9细胞对Bends细胞建立的体外BBB模型紧密连接的破坏能力.
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