【摘 要】
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目的 探讨微小RNA138 (miR-138)/沉默信息调节因子1(sirt-1)调控非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和转移的机制研究.方法 反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测sirt-1在临床样
【机 构】
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同济大学附属东方医院呼吸内科,上海,200120
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目的 探讨微小RNA138 (miR-138)/沉默信息调节因子1(sirt-1)调控非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和转移的机制研究.方法 反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测sirt-1在临床样本NSCLC组织和癌旁组织的表达.选取NSCLC细胞株A549和H1299,通过lipo3000分别转染空质粒、miR-138成熟体和miR-138抑制剂,将实验分组为对照组、miR-138组、miR-138抑制组.双荧光素酶报告、RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-138与sirt-1的靶向关系;Cell Counting Kit-8、EdU检测miR-138对A549和H1299增殖的影响;划痕实验、Transwell检测miR-138对A549和H1299迁移和侵袭的影响;Western blot检测上皮间叶转化标记物[上皮-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]的表达.结果 sirt-1 mRNA水平在NSCLC组织较癌旁组织表达明显升高;双荧光素酶报告提示共转miR-138成熟体+野生型sirt-1质粒较其他质粒活性减低;与对照组比较,miR-138组中sirt-1表达下降,miR-138抑制组中sirt-1表达升高;与对照组比较,miR-138组中细胞增殖和转移降低,miR-138抑制组的细胞增殖和转移升高;与对照组比较,miR-138组A549中E-cadherin表达升高,两细胞株Vimentin表达下降,而miR-138抑制后,结果完全相反.结论 miR-138通过调控sirt-1抑制NSCLC的增殖和转移,提示miR-138/sirt-1可能成为临床治疗NSCLC潜在位点.
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