【摘 要】
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目的探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin，TG)对柯萨奇病毒B3(coxsachievirus B3，CV-B3)病毒复制的影响。方法将10个MOI的病毒感染HeLa细胞后，在病毒的吸附和补液过程中加入0.25 μmol/L的TG，分别在药物刺激的3 h、6 h和9 h收集病毒感染的样品。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CV-B3病毒复制效率；分别使用0.25 μmol
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室 传染病诊断和治疗协同中心，北京 102206,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室 传染病诊断和治疗协
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目的探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin，TG)对柯萨奇病毒B3(coxsachievirus B3，CV-B3)病毒复制的影响。
方法将10个MOI的病毒感染HeLa细胞后，在病毒的吸附和补液过程中加入0.25 μmol/L的TG，分别在药物刺激的3 h、6 h和9 h收集病毒感染的样品。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CV-B3病毒复制效率；分别使用0.25 μmol/L、0.08 μmol/L和0.025 μmol/L的TG刺激CV-B3病毒感染细胞，通过噬斑形成试验进一步验证TG对病毒复制的影响；通过内质网应激3条通路的抑制剂分别作用于TG刺激的病毒感染细胞，通过qRT-PCR检测病毒量的变化。
结果qRT-PCR结果显示，TG刺激后，相对于对照，病毒量在3 h没有发生明显的变化；在病毒感染的6 h和9 h，病毒量分别增加了2.5倍和158.6倍。噬斑形成试验显示，TG作用后，病毒的噬斑明显增大。通过加入内质网应激的3条通路PERK、ATF6和IRE1的抑制剂GSK2656157、AEBSF和STF-083010发现，加入ATF6的抑制剂AEBSF 6 h后，病毒增加量下降了90%；AEBSF作用9 h后，病毒增加量下降了55%。
结论TG能够通过ATF6途径诱导内质网应激并有效的促进CV-B3病毒的复制。
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