【摘 要】
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目的:探讨在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)刺激下,卵泡抑素样蛋白1(fol-listatin like protein 1,FSTL1)在小鼠血管平滑肌细胞(vascular smoot
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院心血管内科,上海 200011
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目的:探讨在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)刺激下,卵泡抑素样蛋白1(fol-listatin like protein 1,FSTL1)在小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转化过程中的作用.方法:检测小鼠血管沉积Ox-LDL的病变区域中FSTL1的表达水平,再通过体外实验进一步验证Ox-LDL对FSTL1表达量的影响.运用蛋白质印迹法检测VSMC不同状态下收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、沉默信息调节蛋白1(silencing information regulatory protein 1,SIRT1)和分泌型标志物骨桥蛋白(osteopon-tin,OPN)的表达情况.通过增殖实验验证Ox-LDL和FSTL1作用下VSMC的增殖情况.结果:与对照组相比,小鼠Ox-LDL沉积的病变血管区FSTL1表达减少(0.223±0.010比0.097±0.019,t=27.381,P<0.01).采用Ox-LDL 0、12.5、25、50 mg/L分别刺激VSMC 24 h,FSTL1表达水平分别为1.330±0.055、0.905±0.027、0.753±0.037和0.243±0.016,Ox-LDL浓度为50 mg/L时,FSTL1表达水平最低(F=260.600,P<0.0001).在此基础上用50 mg/L Ox-LDL分别刺激VSMC 0、6、12、24 h,FSTL1的表达分别为1.383±0.033、0.782±0.047、0.381±0.022和0.230±0.017,Ox-LDL诱导时间为24 h时,FSTL1表达水平最低(F=151.000,P<0.0001).Ox-LDL诱导下,VSMC分泌的α-SMA(1.303±0.030比0.493±0.069,P<0.01)和SIRT1(0.993±0.044比0.613±0.030,P<0.01)表达减少,但OPN表达增多(1.001±0.031比2.698±0.001,P<0.01).在Ox-LDL刺激的基础上加入FSTL1共刺激,结果与Ox-LDL刺激组相反[OPN 2.698±0.002比1.590±0.001(P<0.05),α-SMA 0.493±0.062比0.653±0.015(P<0.05),SIRT10.613±0.030比1.231±0.011(P<0.05)].加入SIRT1抑制剂,Ox-LDL+FSTL1的条件下出现VSMC中 α-SMA(0.530±0.033比0.283±0.032,P<0.01)和SIRT1(1.056±0.020比0.207±0.021,P<0.01)表达减少,但OPN表达增多(1.643±0.047比3.533±0.100,P<0.01).Ox-LDL刺激组细胞增殖能力上升(0.870±0.010比1.890±0.020,P<0.01),但Ox-LDL联合FSTL1组的增殖能力比Ox-LDL刺激组弱(1.890±0.021比1.200±0.023,P<0.05).通过阻断SIRT1的作用,FSTL1失去抵抗Ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖的能力(1.280±0.033比2.030±0.092,P<0.01).结论:Ox-LDL的刺激下调FSTL1的表达.通过回补FSTL1,能有效抑制Ox-LDL刺激导致的VSMC过度增殖.
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