【摘 要】
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目的 研究黄芪多糖是否通过miR-193a-3p/STMN1轴对溃疡性结肠炎大鼠结肠细胞凋亡和氧化应激的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为对照组和模型组，每组30只。模型组采用三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇复合法构建大鼠溃疡型结肠炎模型，对照组给予等量的50%乙醇，之后分离培养对照组和模型组大鼠结肠上皮细胞。溃疡型结肠炎大鼠结肠上皮细胞分别给予100、200、400μg/mL黄芪多糖，流式细胞术
【基金项目】
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湖北省卫生和计划生育委员会资助项目（NO:WJ2015MB184）；
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目的 研究黄芪多糖是否通过miR-193a-3p/STMN1轴对溃疡性结肠炎大鼠结肠细胞凋亡和氧化应激的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为对照组和模型组，每组30只。模型组采用三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇复合法构建大鼠溃疡型结肠炎模型，对照组给予等量的50%乙醇，之后分离培养对照组和模型组大鼠结肠上皮细胞。溃疡型结肠炎大鼠结肠上皮细胞分别给予100、200、400μg/mL黄芪多糖，流式细胞术、免疫印迹实验（Western blot）和实时定量PCR（qRT-PCR）分别检测细胞凋亡、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、miR-193a-3p表达。试剂盒检测丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。在溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞中转染anti-miR-con、anti-miR-193a-3p模拟物、si-NC、si-STMN1过表达质粒，并给予400μg/mL黄芪多糖，分别记为APS+anti-miR-con组、APS+anti-miR-193a-3p组、APS+anti-miR-193a-3p+si-NC组、APS+anti-miR-193a-3p+si-STMN1组，采用上述方法检测溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞凋亡、氧化应激变化。生物信息学starbase预测和双荧光素酶报告实验验证miR-193a-3p与STMN1靶向作用。结果 与对照组比较，模型组大鼠结肠上皮细胞的凋亡率、Bax、STMN1蛋白表达量、MDA、LDH水平增加，Bcl-2蛋白、miR-193a-3p表达量、SOD、GSH-Px水平减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较，100、200、400μg/mL黄芪多糖减少溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的凋亡率、Bax、STMN1蛋白表达量、MDA、LDH水平，提高Bcl-2蛋白、miR-193a-3p表达量、SOD、GSH-Px水平，均呈剂量依赖性，且差异有统计学意义（P＜0.05）。与APS+anti-miR-con组比较，APS+anti-miR-193a-3p组溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的miR-193a-3p表达量、凋亡率、Bax蛋白表达量、MDA、LDH水平升高，Bcl-2蛋白表达量、SOD、GSH-Px水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。miR-193a-3p直接靶向STMN1。与APS+anti-miR-193a-3p+si-NC组比较，APS+anti-miR-193a-3p+si-STMN1组溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的STMN1、Bcl-2蛋白表达量、SOD、GSH-Px水平增加，凋亡率、Bax蛋白表达量、MDA、LDH水平减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 黄芪多糖通过上调miR-193a-3p靶向STMN1,减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的凋亡和氧化应激。
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