【摘 要】
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目的 探讨不同聚合酶链反应(PCR)增强剂对胆酸盐、尿素和血红素抑制作用的消除效果.方法 将13种不同浓度的PCR增强剂[亚精胺、甲酰胺、PEG6000、NP40、Tween-20、甜菜碱、海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)、明胶、硫酸铵、四甲基氯化铵(TMAC)、甘油、Triton X-100]加入含胆酸盐、尿素和血红素的扩增体系中,采用荧光PCR检测,根据循环阈值(Ct)分析不同PCR增强剂的抗抑制效果.结果 6.5 mmol/L亚精胺、20％甘油可消除6.98 mmol/L胆酸盐对PCR的抑制作用,6.
【机 构】
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郑州安图生物工程股份有限公司研发中心,河南 郑州 450016
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目的 探讨不同聚合酶链反应(PCR)增强剂对胆酸盐、尿素和血红素抑制作用的消除效果.方法 将13种不同浓度的PCR增强剂[亚精胺、甲酰胺、PEG6000、NP40、Tween-20、甜菜碱、海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)、明胶、硫酸铵、四甲基氯化铵(TMAC)、甘油、Triton X-100]加入含胆酸盐、尿素和血红素的扩增体系中,采用荧光PCR检测,根据循环阈值(Ct)分析不同PCR增强剂的抗抑制效果.结果 6.5 mmol/L亚精胺、20％甘油可消除6.98 mmol/L胆酸盐对PCR的抑制作用,6.5 mmol/L亚精胺、100 mmol/L硫酸铵、0.2 mol/L甜菜碱可消除0.99 mol/L尿素对PCR的抑制作用.300 mmol/L BSA、6.5 mmol/L亚精胺、20％PEG6000、50％甘油可消除6.98 mmol/L血红素对PCR的抑制作用.40％甲酰胺、10％NP40、40％Tween-20、1.5 mol/L海藻糖、2％明胶、200 mmol/L TMAC和20％Triton X-100均无法降低6.98 mmol/L胆酸盐、0.99 mol/L尿素和6.98 mmol/L血红素对PCR的抑制作用.结论 添加不同类型的PCR增强剂可有效提高荧光PCR的检测灵敏度和准确性.
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