基于悬浮培养技术的高效血清4型禽腺病毒灭活疫苗的创制

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为制备高效血清4型禽腺病毒(FAdV-4)JH株灭活疫苗,首先利用激流式生物反应器的培养参数进行优化,并扩增获得大量JH株FAdV-4。经检验;收获的JH株的病毒滴度大于1×108.5TCID50/m L,且灭活检验及无菌检验的结果均符合标准。将检验合格的JH株病毒液乳化制备了3批FAdV-4灭活疫苗成品,此灭活疫苗为油包水型,黏度在30 cP左右,性状稳定,离心后无水相析出,并且能够在2~8℃条件下保存长达15个月。将本研究制备的灭活疫苗接种给SPF鸡后鸡群无不良反应,并且在免疫后第21天能够产生高水平的中和抗体,平均效价大于1∶75;在致死剂量FAdV-4攻毒情况下,FAdV-4灭活疫苗能对免疫鸡群提供高达100%的保护率。进一步对疫苗的最低免疫剂量和免疫持续期进行测定,结果,采用皮下或肌注免疫方式对14日龄和120日龄鸡群接种的最低免疫剂量分别为0.3 m L和0.5 m L,免疫后疫苗免疫持续期可长达5月。结果证实,本研究研制的FAdV-4灭活疫苗安全有效,可为FAdV-4的防控提供有力技术支撑。
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