目的 验证基于吖啶橙（AO）/碘化丙啶（PI）荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）数量及活率的可行性，并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测，建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周血分离、培养CIK细胞，取培养过程中的细胞使用AO/PI荧光染色法、应用自动细胞分析仪检测细胞数量及活率，对结果的专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围进行验证。应用建立的方法对外周血分离后的外周血单个核细胞（PBMC）、培养过程中、冻存前及复苏后的CIK细胞数量及活率进行全过程检测。结果 专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围验证均符合预期要求。CIK细胞培养全过程活率均不低于80%，样本平均倍增时间为（42.26±1.17）h。冻存前的CIK细胞在加入含5%DMSO的冷冻保护剂后90 min内活率稳定，复苏后未经稀释或洗涤处理120 min内活率稳定，复苏后经洗涤去除DMSO处理后12 h内活率稳定。结论 基于AO/PI荧光染色原理的自动细胞分析仪可以用于检测CIK细胞的数量及活率，其结果可以用于细胞放行评价及稳定性研究。