【摘 要】
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目的 探究葛根素（PR）对角质形成细胞生长因子（KGF）诱导的HaCaT细胞银屑病模型的影响及其作用机制。方法 使用40 ng·mL-1的KGF处理细胞0、12、24、48、72 h后使用细胞计数-8（CCK-8）实验检测细胞光密度（OD）值筛选最佳作用时间。然后将细胞分为Control（正常培养）、KGF（KGF）、KGF+PR-L(KGF+3 mg·mL-1PR处理)、KGF+PR-H(KGF
【机 构】
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山东第一医科大学第二附属医院皮肤科
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目的 探究葛根素（PR）对角质形成细胞生长因子（KGF）诱导的HaCaT细胞银屑病模型的影响及其作用机制。方法 使用40 ng·mL-1的KGF处理细胞0、12、24、48、72 h后使用细胞计数-8（CCK-8）实验检测细胞光密度（OD）值筛选最佳作用时间。然后将细胞分为Control（正常培养）、KGF（KGF）、KGF+PR-L(KGF+3 mg·mL-1PR处理)、KGF+PR-H(KGF+6 mg·mL-1PR处理)、KGF+PR-H+pcDNA-NC(KGF+6 mg·mL-1PR处理，并转染pcDNA-NC)、KGF+PR-H+pcDNA-NLRP3(KGF+6 mg·mL-1PR处理，并转染pcDNA-NLRP3)组。用CCK-8检测细胞增殖能力，用平板克隆实验检测细胞克隆形成能力，用流式细胞术检测细胞周期进程，用蛋白质印迹（Western blot）法检测Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、周期素依赖性激酶2（CDK2）蛋白表达情况，用酶联免疫吸附（EILSA）实验检测各组细胞白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1 （TGF-β1）、白细胞介素-17（IL-17）炎症因子表达情况。结果 Control、KGF、KGF+PR-L、KGF+PR-H、KGF+PR-H+pcDNA-NC、KGF+PR-H+pcDNA-NLRP3组细胞存活率分别为（100.00±2.79）%,（157.95±5.14）%,（137.90±4.85）%,（114.50±9.30）%,（113.94±9.09）%和（141.91±5.72）%;克隆数目分别为（205.50±14.84）,（341.83±21.37）,（297.17±20.05）,（237.50±11.07）,（234.17±16.06）和（307.67±15.16）个；G0/G1期细胞比例分别为（55.25±2.02）%,（51.00±2.04）%,（57.95±2.45）%,（71.50±3.23）%,（70.11±2.77）%和（51.98±2.59）%;IL-17含量分别为（58.80±5.35）,（209.85±15.83）,（140.34±10.26）,（86.69±3.35）,（86.65±3.04）和（193.45±5.25）pg·mL-1。以上指标，Control与KGF组比较，KGF+PR-L、KGF+PR-H组与KGF组比较，KGF+PR-L与KGF+PR-H组比较，KGF+PR-H+pcDNA-NC组与KGF+PR-H+pcDNA-NLRP3组比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论 葛根素可通过抑制NLRP3的表达，抑制HaCaT细胞增殖能力和炎症反应，并诱导细胞周期阻滞。
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