【摘 要】
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建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴（rhesus macaque）外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,用含5%猴自体血清、1 000 U·mL-1白介素-2（IL-2）和不同浓度唑来膦酸(1,5,10μmol·L-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细
【基金项目】
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国家自然科学基金（81201261,81301428和81471943）； 海关总署应急技术保障专项（2018IK036）； 武汉大学自主科研项目（2042015kf0188,2042018kf0034）；
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建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴（rhesus macaque）外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,用含5%猴自体血清、1 000 U·mL-1白介素-2（IL-2）和不同浓度唑来膦酸(1,5,10μmol·L-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析。结果显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8 d时,1μmol·L-1和5μmol·L-1处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91. 4%和93. 1%;5μmol·L-1处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75. 6%、75. 5%以及78. 0%;5μmol·L-1处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84. 8%。本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLADR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用。
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