【摘 要】
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目的 基于细胞凋亡Fas和TRAIL死亡受体信号通路探讨黄芪注射液对大鼠急性脊髓损伤（SCI）的神经保护作用及机制。方法 40只健康的雄性SD大鼠随机分为假手术组，SCI模型组，黄芪注射液低、中、高剂量(1、2、4 mL·kg-1)组，每组8只。采用改良的重物打击法构建大鼠急性SCI模型；按照BBB评分和Rivlin斜板实验评价大鼠运动功能；苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin, HE
【基金项目】
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南通市卫生健康委员会青年课题A项目（QA2020016）； 南通大学校级科研基金青年项目（2019LQ016）； 南通市科技局社会民生科技计划项目（通科技[2020]170号）； 江苏省卫健委面上项目（H2019027）；
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目的 基于细胞凋亡Fas和TRAIL死亡受体信号通路探讨黄芪注射液对大鼠急性脊髓损伤（SCI）的神经保护作用及机制。方法 40只健康的雄性SD大鼠随机分为假手术组，SCI模型组，黄芪注射液低、中、高剂量(1、2、4 mL·kg-1)组，每组8只。采用改良的重物打击法构建大鼠急性SCI模型；按照BBB评分和Rivlin斜板实验评价大鼠运动功能；苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin, HE）染色检测脊髓组织病理变化；尼氏染色法检测脊髓神经元细胞损伤程度；高通量转录组测序分析差异表达基因；qPCR验证基因转录水平的表达量；利用TUNEL试剂盒检测各组脊髓细胞凋亡情况；Western blot检测凋亡通路关键蛋白表达水平。结果 BBB评分和斜板试验结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠表现出明显的运动功能障碍；HE染色显示模型组脊髓组织病理病变严重；模型组尼氏染色着色较浅，神经元细胞损伤严重；与假手术组比较，模型组脊髓中4 597个基因差异表达，Fas、TRAIL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Bax蛋白表达显著上调（P＜0.01）,Fas凋亡抑制分子FAIM和抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达量显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，黄芪注射液组的BBB评分、Rivlin斜板度数显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,组织病变程度较小，尼氏染色着色程度随剂量升高而变深，黄芪注射液高剂量组脊髓神经细胞损伤和凋亡得到显著缓解（P＜0.01）。转录组测序和qPCR结果显示：与模型组比较，黄芪注射液中、高剂量组中参与细胞凋亡调控的FAIM和TRAIL mRNA差异表达（P＜0.01）,黄芪注射液高剂量组Fas、TRAIL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Bax蛋白表达被剂量依赖性地抑制（P＜0.05,P＜0.01）,FAIM和Bcl-2的蛋白表达上调（P＜0.01）。结论 黄芪注射液可能通过对死亡受体途径Fas和TRAIL蛋白的抑制，进而调控神经元细胞的程序性凋亡，发挥对SCI的神经保护作用，改善脊髓组织损伤病变程度，加速后期神经运动功能障碍的恢复。
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