小檗碱对沙门菌LPS诱导的猪肠道上皮细胞屏障损伤的改善作用

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试验旨在研究小檗碱(BBR)对沙门菌脂多糖(LPS)诱导的猪肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症的调控作用。首先采用CCK-8法测定LPS和BBR处理IPEC-J2的最佳处理浓度、最佳处理时间以及给药顺序,后将IPEC-J2分为对照组、BBR组(80μmol/L)、LPS组(5μg/mL)和BL组(5μg/mL LPS+80μmol/L BBR);采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测4个组中IL-1β、IL-6及紧密连结蛋白ZO-1和Occludin的mRNA表达量;采用免疫荧光技术检测4个组中Occludin、ZO-1蛋白分布定位情况及其荧光强度;采用Western blot法检测各组中Occludin、ZO-1表达水平。研究结果显示:与对照组相比,LPS组的炎性细胞因子IL-6和IL-1β的mRNA表达水平显著上升(P<0.05);与BBR组和LPS组相比,BL组的IL-6和IL-1β的mRNA表达水平显著下调(P<0.05),而ZO-1和Occludin的mRNA表达水显著上升(P<0.05);免疫荧光结果与Western blot结果均显示,与LPS组相比,BL组的Occludin和ZO-1的蛋白表达量均显著上升(P<0.05)。研究结果表明BBR可抑制LPS诱导IPEC-J2的炎症反应,保护肠上皮细胞的屏障功能。
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