清热化瘀方对脑缺血再灌注大鼠脑组织氧化应激反应的影响及机制

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目的 探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注(I/R)大鼠脑组织氧化应激反应的影响及其作用机制.方法 32只SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组及清热化瘀方组4组,每组8只.除正常组外,其余各组均采用线栓法进行处理;大鼠造模后正常饲养,自由饮水;清热化瘀方组给予清热化瘀方(1.4 mL/100 g,bid)灌胃,其余各组均给予等体积生理盐水灌胃,4天后处死.采用RT-qPCR、Western blot和ELISA法分别检测缺血灶脑组织中miR-18a-3p表达、Keap1、Nox-2、Nox-4、HO-1、SOD2 mRNA和蛋白表达、Nrf2核转位及ROS水平.双荧光素酶报告基因检测miR-18a-3p与Keap1的相互作用.结果 与正常组相比,模型组缺血灶脑组织中miR-18a-3p、HO-1、SOD2表达及Nrf2核转位显著降低,Nox-2、Nox-4、Keap1表达及ROS水平显著升高(均P<0.05);与模型组相比,清热化瘀方组缺血灶脑组织中miR-18a-3p、HO-1、SOD2表达及Nrf2核转位显著升高,Nox-2、Nox-4、Keap1表达和ROS水平显著降低(均P<0.05);假手术组与正常组的检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05).双荧光素酶报告基因检测结果证实,miR-18a-3p靶向Keap1基因的3\'UTR.结论 清热化瘀方可抑制脑缺血再灌注大鼠脑组织氧化应激反应,其机制可能与促进缺血灶脑组织miR-18a-3p表达,进而抑制Keap1表达,促进Nrf2核转位有关.
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