基于转录组测序技术探究电针促进新西兰兔骨缺损愈合的作用机制

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目的 基于转录组测序技术观察电针促进骨折愈合过程中肾组织基因表达谱变化,揭示电针促进骨折愈合的分子生物学机制。方法 将42只新西兰兔随机分为正常组6只、骨缺损组18只、电针组18只。骨缺损组与电针组使用咬骨钳在新西兰兔右前肢桡骨中段造成骨缺损模型。造模后,电针组在骨缺损肢体侧的合谷、曲池穴处,采用疏密波(频率2/100 Hz,电流2.1 mA)进行电针干预,30min/次,1次/d,连续干预4周。分别在实验1,2,4周末对骨缺损组与电针组兔前肢进行X射线平扫,采用Lane-Sandhu X射线评分评估骨折愈合情况;在实验2周末每组随机选取3只兔,进行肾脏组织转录组测序以检测基因表达情况。结果 实验1,2,4周末,电针组X射线骨形成评分、骨连接评分、骨塑形评分均较同期骨缺损组高,但仅2周末时X射线骨塑形评分与骨缺损组比较差异有统计学意义(P<0.05)。转录组测序显示:正常组与骨缺损组间有454个差异表达基因(上调基因255个,下调基因199个),骨缺损组与电针组间有444个差异表达基因(上调基因179个,下调基因265个)。钙感应受体(CASR)基因在骨缺损组和电针组的肾脏中差异表达,GO分析发现骨缺损组与电针组的差异基因富集在钙离子稳态和细胞钙离子稳态等生物学过程中。结论 电针可显著促进新西兰兔骨折愈合,其作用机制可能与调节肾脏CASR基因表达和“钙离子稳态”通路有关。
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