【摘 要】
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目的构建含有人叉头框蛋白O1(FoxO1)结合靶位点(即胰岛素反应元件,IRE)的以萤火虫荧光素酶(Luc2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为双报告基因的FoxO1抑制剂高通量筛选细胞模型,
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫健委抗生素生物工程重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81473214、81402929、81621064),“重大新药创制”国家科技重大专项(2018ZX09711001-007-002、2018ZX09711001-003-006),中国医学科学院医学与健康科技创新工程(2016-I2M-2-002、2016-I2M-1-011).
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目的构建含有人叉头框蛋白O1(FoxO1)结合靶位点(即胰岛素反应元件,IRE)的以萤火虫荧光素酶(Luc2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为双报告基因的FoxO1抑制剂高通量筛选细胞模型,进行FoxO1抑制剂的筛选,并对获得的阳性化合物细胞活性进行初步研究,以期获得能够调节糖脂代谢紊乱相关疾病的先导化合物或候选药物。方法用分子生物学的方法,构建含有胰岛素反应元件的并连接Luc2和EGFP双报告基因的重组载体pc-IRE-LE。将体外培养的HEK293T细胞用该重组载体进行瞬时转染,分别利用萤火虫荧光素
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