【摘 要】
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该文探讨了miR-32-3p通过靶向Smad3调节氧糖剥夺/再灌注损伤中的细胞活力。通过利用SK-N-SH细胞构建了一个研究脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）的氧糖剥夺/再灌注（oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R）模型。通过生物信息学预测miR-32-3p的靶基因并进行
【基金项目】
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内蒙古自然科学基金（批准号:2021MS08033）； 内蒙古缺氧转化医学重点实验室开放基金（批准号:KFKT202002）； 内蒙古人民医院自然科学基金（批准号:2019YN09）资助的课题～～；
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该文探讨了miR-32-3p通过靶向Smad3调节氧糖剥夺/再灌注损伤中的细胞活力。通过利用SK-N-SH细胞构建了一个研究脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）的氧糖剥夺/再灌注（oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R）模型。通过生物信息学预测miR-32-3p的靶基因并进行功能注释和筛选;通过双荧光素酶报告实验、实时定量PCR、Western blot、CCK-8和活/死细胞检测等实验检测miR-32-3p通过靶向Smad3对细胞活力的影响。结果显示,Smad3是miR-32-3p的新靶点,并且在SK-N-SH OGD/R模型中miR-32-3p表达上调。CCK-8分析表明,与miR-32-3p抑制剂对照组和shNC组相比,sh-Smad3和miR-32-3p抑制剂+sh-Smad3组的细胞活力显著降低。随后,活/死细胞活力测定进一步支持了这些结果。与抑制剂NC和shNC组相比,sh-Smad3和miR-32-3p抑制剂+sh-Smad3组中可观察到更多以红色荧光表示的死亡细胞。与SK-N-SH细胞相比,OGD/R细胞的Lats2、Yap/Taz和Smad3水平降低。这些结果表明,缺乏Smad3可能会抑制细胞活力。这些结果说明,Hippo信号通路中的Smad3、Lats2和Yap/Taz可能共同调节细胞活力。
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