论文部分内容阅读
目的:建立人血管生成素(angiogenin, ANG)的真核表达系统并在细胞内亚定位.方法:采用亚克隆技术构建重组荧光真核细胞表达质粒pEGFP/ANG, 然后经脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并对转染细胞内pEGFP/ANG的表达用荧光显微镜和免疫组化染色进行鉴定.用共聚焦显微镜和免疫电镜观察ANG的亚细胞定位.结果:荧光显微镜观察可见转染的HUVEC内发出强绿色荧光.免疫组化染色检测显示, 转染的HUVEC中有棕色颗粒.共聚焦显微镜及免疫电镜检查显示, ANG集聚于细胞核区.结论:以构建的重组体pEGFP/ANG转染HUVEC后, 可表达人ANG蛋白; 表达的ANG定位于细胞核区.