【摘 要】
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目的 探讨miR-138对三阴型乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)MDA-MB-231细胞侵袭、转移的影响及分子机制.方法 将MDA-MB-231细胞转染miR-138 mimics及其阴性对照,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力改变.生物信息学预测miR-138的潜在靶基因,采用双荧光素酶报告实验和Western blot法分析miR-138与FAK的靶向调控关系.回复实验使用Transwell及Western blot实验验证miR-138通过FA
【机 构】
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上海和睦家医院外科,上海 200336;上海交通大学系统生物医学研究院,上海 200240;安徽医科大学第一附属医院普外科,合肥 230022
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目的 探讨miR-138对三阴型乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)MDA-MB-231细胞侵袭、转移的影响及分子机制.方法 将MDA-MB-231细胞转染miR-138 mimics及其阴性对照,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力改变.生物信息学预测miR-138的潜在靶基因,采用双荧光素酶报告实验和Western blot法分析miR-138与FAK的靶向调控关系.回复实验使用Transwell及Western blot实验验证miR-138通过FAK抑制MDA-MB-231细胞侵袭、转移.结果 Transwell实验结果表明:过表达miR-138后,MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.05).生物信息学预测FAK为miR-138的潜在靶基因,双荧光素酶报告实验结果表明:FAK 3\'UTR区域存在miR-138的互补结合位点.Western blot结果发现过表达miR-138后FAK蛋白表达降低.回复实验Transwell及Western blot结果表明:上调FAK可以部分恢复miR-138过表达所抑制的细胞迁移和侵袭能力(P<0.05);使用FAK siRNA敲低FAK可以部分恢复miR-138抑制所增强的细胞迁移与侵袭能力(P<0.05).结论 miR-138靶向调控FAK抑制TNBC细胞的侵袭、转移.
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