【摘 要】
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目的 建立生物素体外红细胞标记技术平台,探究不同储存时间4℃去白悬浮红细胞输血后24 h回收率(PTR24h)与红细胞凋亡、膜表面分子及能量代谢等体外质量指标之间相关性.方法 设置不同生物素浓度:0,1,2.5,5,7.5,10,12.5μg/mL对小鼠红细胞(约1×109/mL)进行标记,并通过流式细胞术分析确定最佳标记条件.依据最佳条件对小鼠4℃不同储存时间(0,2,4,6,8,10,12,14 d)去白悬浮红细胞进行生物素化后输入小鼠体内,24 h后采血并采用流式细胞术分析计算其PTR24h.同时测
【机 构】
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100850 北京,军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所
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目的 建立生物素体外红细胞标记技术平台,探究不同储存时间4℃去白悬浮红细胞输血后24 h回收率(PTR24h)与红细胞凋亡、膜表面分子及能量代谢等体外质量指标之间相关性.方法 设置不同生物素浓度:0,1,2.5,5,7.5,10,12.5μg/mL对小鼠红细胞(约1×109/mL)进行标记,并通过流式细胞术分析确定最佳标记条件.依据最佳条件对小鼠4℃不同储存时间(0,2,4,6,8,10,12,14 d)去白悬浮红细胞进行生物素化后输入小鼠体内,24 h后采血并采用流式细胞术分析计算其PTR24h.同时测定和分析不同储存时间红细胞膜表面CD47分子、磷脂酰丝氨酸(PS)、细胞内ATP含量变化.最终利用SPSS软件分析不同储存时间红细胞体外相关质量指标与其输注后体内PTR24h之间的相关性.结果 综合分析后确定小鼠1×109/mL红细胞的生物素标记最佳浓度为:7.5μg/mL,标记率>99％.以溶血率及红细胞凋亡率为质量控制指标,生物素标记未造成大量红细胞破裂(溶血率<1.5％)及明显细胞凋亡.CD47分子平均荧光强度从第10天开始降低(P<0.05);PS占比则从第8天开始随储存时间延长而增加(P<0.05);ATP含量从第2天起降低,与新鲜红细胞相比差异具有统计学意义(P<0.05).不同储存时间去白悬浮红细胞输入小鼠体内后,其体内PTR24h呈下降趋势,储存10 d(65.8±2.9)％、12 d(70.3±5.3)％、14 d(52.9±7.9)％,红细胞PTR24h与新鲜红细胞(94.0±0.6)％输注相比降低,差异有统计学意义(P<0.05),且低于75％.对体内外指标的Pearson相关性分析结果显示,CD47、ATP均与PTR24h具有强的正相关性,相关系数r值分别为0.954(P<0.01)和0.938(P<0.01),而PS则与PTR24h呈负相关,r=–0.777(P<0.05).结论 4℃不同储存时间去白悬浮红细胞的膜表面分子CD47表达量、PS外翻率及ATP含量与其PTR24h具有强相关性,而上述红细胞体外质量指标的测定可为临床评估红细胞能否有效输注提供参考.
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