富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞增殖、迁移和分泌Ⅰ型胶原的影响

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目的 体外研究富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGF)增殖、迁移和Ⅰ型胶原表达能力的影响.方法 采用组织块培养法原代培养人牙龈成纤维细胞,采用Choukroun的方法制备PRF,将自体PRF与HGF共培养,分为PRF1组(含1片PRF膜)、PRF2组(含2片PRF膜)和空白对照组,每组设6个复孔,共培养1、3、5d后,甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞毒性及增殖水平;酶联免疫吸附测定法检测培养上清液中Ⅰ型胶原的分泌水平;制备PRF膜浸出液,分为PRF1组、PRF2组和空白对照组,每组设6个复孔,Transwell系统检测PRF膜浸出液对HGF迁移的作用.结果 细胞增殖实验显示,第1、3、5天PRF1组A值(0.615±0.036、0.686±0.006、0.693±0.004)和PRF2组A值(0.653±0.023、0.766±0.034、0.775±0.053)均显著高于空白对照组(0.514±0.020、0.544±0.006、0.545±0.009) (P <0.01),PRF1组和PRF2组A值差异无统计学意义(P>0.05);各组内不同时间点间相比,随时间递增A值均显著增高(P<0.01).细胞迁移实验显示,PRF1组和PRF2组细胞迁移数[分别为(85.67±2.94)、(85.83±1.47)]均显著高于空白对照组(54.17±2.48)(P <0.01);PRF1组和PRF2组细胞迁移数差异无统计学意义(P>0.05);细胞分泌Ⅰ型胶原实验显示,第1、3、5天PRF1组A值(0.184±0.004、0.200±0.004、0.204±0.009)和PRF 2组A值(0.213±0.008、0.226±0.005、0.229±0.006)均显著高于空白对照组(0.174±0.002、0.184±0.002、0.186±0.003) (P <0.01),PRF1组和PRF2组A值差异无统计学意义(P>0.05);各组内不同时间点间相比,随时间递增A值均显著增高(P<0.01).结论 PRF对HGF的生物学行为具有显著促进作用,PRF与种子细胞HGF相结合,在治疗牙龈退缩及牙周组织工程中具有较大的临床应用潜能。

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